[发明专利]一种养分高效利用耐除草剂玉米连HH2823转化事件及其特异性鉴定方法和应用有效
| 申请号： | 202011241078.4 | 申请日： | 2020-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN112280786B | 公开（公告）日： | 2022-12-02 |
| 发明（设计）人： | 苏乔;王梦姣;徐永盛 | 申请（专利权）人： | 大连理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/54;C12N15/82;C12N5/10;C12N1/21;C12Q1/6895;A01H1/02;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人： | 周莹;李馨 |
| 地址： | 116024 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 养分 高效 利用 除草剂 玉米 hh2823 转化 事件 及其 特异性 鉴定 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种耐除草剂转基因玉米的鉴定方法，其特征在于，该转基因玉米以SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列为外源基因的左侧翼区，以SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列为外源基因的右侧翼区，外源T-DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，其中包含编码钾转运蛋白基因AlHAK1和耐除草剂草铵膦基因bar的核苷酸序列；所述鉴定方法中用于特异性PCR鉴定的引物如下：
PR1上游引物：CGAGTTTCTCCATAATAATGTGTGA；
PR1下游引物：GAGAACTACTGGAGTTGCTCTATA；
PR2上游引物：AGCTTGGCACTGGCCGTCGTTTTAC；
PR2下游引物：TGAGGACACGATTTACGACACTTGA；
其中PR1引物对检测外源基因左侧是否与玉米基因组特异性位点连接，预期扩增目的片段大小为1045bp；PR2引物对检测外源基因右侧是否与玉米基因组特异性位点连接，预期扩增目的片段大小为700bp，根据是否扩增出符合预期片段大小的目的条带鉴定是否为耐除草剂转基因玉米。
2.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，所述钾转运蛋白基因AlHAK1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述耐除草剂草铵膦基因bar的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
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