[发明专利]一种丁酸梭菌及其在固定化发酵生产1，3-丙二醇的应用

权利要求书

1.一种丁酸梭菌（Clostridium butyricum）SCUT343-4，其特征在于，该菌于2019年10月12日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO：60805。

2.权利要求1所述丁酸梭菌SCUT343-4在固定化发酵生产1,3-丙二醇中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述丁酸梭菌SCUT343-4进行发酵，当所述丁酸梭菌处于指数生长期时，菌体在固定化反应器中固定化后即进行发酵产1,3-丙二醇。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：

（1）菌种活化：将丁酸梭菌SCUT343-4菌液稀释后，涂布于固体活化培养基，35～37℃培养16～24h，挑取单菌落接种于种子培养基中，37±2℃静置厌氧培养16～24h，至OD₆₀₀为1.2～1.8；

（2）种子培养：取丁酸梭菌SCUT343-4活化菌液接种于种子培养基中，35～37 ℃静置厌氧培养10～13h，至OD₆₀₀为1.2～1.8；

（3）细胞固定化：将种子液按照发酵液体积的10±5％接入发酵罐中进行发酵；待发酵罐中OD₆₀₀达到5时，连通发酵罐和固定化反应器，将发酵罐内菌液泵入固定化反应器中进行细胞固定化，待循环菌液OD稳定后，细胞固定化过程结束；

（4）固定化发酵：将灭菌后的新鲜发酵培养基泵入固定化反应器中，通氮气除氧，再将发酵罐内菌液泵入固定化反应器中，进行发酵；当甘油剩余浓度4～8g/L时，抽出发酵培养基，即完成一个批次发酵；更换新鲜发酵培养基后继续固定化发酵，进行固定化反复批次发酵。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述发酵培养基：纯甘油或粗甘油60～120g/L；酵母粉 5～10g/L；K₂PO₄∙3H₂O 1～2g/L；KH₂PO₄ 0.5～1g/L；(NH₄)₂SO₄ 2～5g/L；MgSO₄·7H₂O 0.2～0.5g/L；CaCl₂ 0.02～0.05g/L；丁酸梭菌微量元素液1ml/L；丁酸梭菌Fe溶液1ml/L；

所述丁酸梭菌微量元素液：CoCl₂∙6H₂O 0.2～0.3g/L; MnCl₂∙4H₂O 0.1～0.2g/L;ZnCl₂ 0.07～0.1g/L; H₃BO₃ 0.06～0.1g/L; Na₂MoO₄∙2H₂O 0.035～0.07g/L; NiCl₂∙6H₂O0.025～0.05g/L; CuCl₂∙2H₂O0.02g/L; 37%的HCl 0.9～1.2 mL/L；所述丁酸梭菌Fe溶液：FeSO₄∙7H₂O 4～6g/L; 37%的HCl 4.0～5.0mL/L。