[发明专利]一种用于特异性检测卡那霉素的电化学发光适配体传感器以及制备方法和应用有效
| 申请号: | 202011222629.2 | 申请日: | 2020-11-05 |
| 公开(公告)号: | CN112505116B | 公开(公告)日: | 2023-01-17 |
| 发明(设计)人: | 陈智栋;温静;单学凌;蒋鼎 | 申请(专利权)人: | 常州大学 |
| 主分类号: | G01N27/327 | 分类号: | G01N27/327;G01N21/76;G01N27/48 |
| 代理公司: | 常州市英诺创信专利代理事务所(普通合伙) 32258 | 代理人: | 王志慧 |
| 地址: | 213164 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 特异性 检测 卡那霉素 电化学 发光 适配体 传感器 以及 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于特异性检测卡那霉素的电化学发光适配体传感器,其特征在于:所述的电化学发光适配体传感器由适配体负载于复合材料HLPNs@Ag/BPQDs修饰到玻碳电极表面,得到COOH-apt/HLPNs@Ag/BP/GCE,用于电化学发光检测卡那霉素;
COOH-apt/HLPNs@Ag/BP/GCE的制备方法如下:
(1)HLPNs@Ag复合材料的制备:将HLPNs分散在超纯水中,依次加入柠檬酸钠和新制的AgNO3,在氮气中室温搅拌,然后通过离心、干燥,制得红棕色固体,即HLPNs@Ag;
(2)通过液相剥离法制备得到黑磷量子点;
(3)HLPNs@Ag/BP复合材料的制备:将HLPNs@Ag和黑磷量子点溶解在水中,室温搅拌,通过离心、干燥,得到产物,即HLPNs@Ag/BP;
(4)将玻碳电极(GCE)抛光、清洗后滴加HLPNs@Ag/BP的水分散液于GCE表面,自然晾干,得到HLPNs@Ag/BP/GCE修饰电极,然后,再滴涂适配体得到COOH-apt/HLPNs@Ag/BP/GCE修饰电极,低温储存备用,得到电化学发光适配体传感器;
所述适配体的核苷酸序列如下所示:
apt: 5'-HOOC-AGA TGG GGG TTG AGG CTA AGC CGA-3'。
2.一种根据权利要求1所述的电化学发光适配体传感器特异性检测卡那霉素的方法,其特征在于,电化学发光检测方法具体步骤如下:
(1)含过硫酸钾(K2S2O8)的磷酸盐缓冲溶液的配制;
(2)含不同浓度卡那霉素和0.1mol/L K2S2O8的PBS缓冲溶液的配制;
准确称取一定量的卡那霉素,用去离子水配制1.0×10-4mol/L溶液,将一定量卡那霉素溶液加入含0.1 mol/L K2S2O8的0.1 mol/L pH=7.4的PBS缓冲溶液中,得到一系列不同浓度的卡那霉素标准溶液,浓度范围为1.0×10-12mol/L~1.0×10-7mol/L;
(3)标准曲线的绘制
将修饰电极COOH-apt/HLPNs@Ag/BP/GCE作为工作电极,铂电极作为辅助电极,Ag/AgCl作为参比电极,组成三电极体系,将三电极体系置于上述含一系列不同浓度卡那霉素和0.1mol/L K2S2O8的PBS缓冲溶液中浸泡一定时间,并以含有0.1mol/L的K2S2O8的pH=7.4的0.1mol/L PBS缓冲液作为空白溶液检测发光强度;在-1.8~0V的电化学窗口范围内,光电倍增管高压800V,扫速0.1V/s,进行循环伏安扫描,记录电位-发光强度曲线(E-ECL),建立加入卡那霉素前后的发光强度差值与卡那霉素浓度对数值的线性关系,得到相应的线性回归方程;
(4)实际样品检测
实际样品检测先作前处理再调节pH,按照上述步骤(3)中的线性回归方程进行计算。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:步骤(1)所述的磷酸盐缓冲溶液含0.1mol/L K2S2O8,磷酸盐缓冲溶液的pH为7.4,其浓度为0.1 mol/L,步骤(3)中所述浸泡一定时间为浸泡20min。
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