[发明专利]新型冠状病毒RNA样本保存液、其制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种新型冠状病毒RNA样本保存液、其制备方法及应用。所述新型冠状病毒RNA样本保存液包括如下组分：表面活性剂0.1～2v/v％、柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液1～100mmol/L、海藻糖0.1～5w/v％、甜菜碱0.2～2mol/L及山梨醇0.5～5w/v％，其余包括溶剂。本发明提供的新型冠状病毒RNA样本保存液的配方组合能够在快速裂解病毒释放RNA的同时，稳定RNA结构，对其形成保护，在高温下放置10天后仍然能够保持RNA的完整性。本发明的配方组合能够直接用于RT‑PCR扩增，各组分不会对扩增过程产生抑制，免去了RNA的抽提，使对病毒的检测步骤更简单，时间更短。

技术领域

本发明涉及一种新型冠状病毒RNA样本保存液，具体涉及一种新冠病毒口腔拭子、鼻咽拭子等样本RNA的保存液及其制备方法与应用，属于生物制品技术领域。

背景技术

新型冠状病毒(2019-nCoV)给人类的健康带来巨大威胁，患者的早诊断，早治疗对疫情的防控具有重大意义。新型冠状病毒是一种RNA病毒，目前早期诊断的主要方式是核酸检测，主要包括实时荧光定量RT-PCR和基因测序两种检测方式，RNA结构的完整性在高效准确的诊断过程中起到了重要作用。由于存在细胞内源性RNA分解酶和环境中外源性RNA分解酶对RNA的降解作用，和RNA本身对环境中温湿度的敏感性，现有的用于RNA类样本的保存液，均需要在低温下(-20℃至-80℃)或者室温下(20℃至-25℃)保存，才能确保RNA结构的完整性，用于下一步实验研究。现有样本保存液的缺点是：1、能够在室温下保存的时间短，采样后样本要快速进行低温保存；2、保存液的效果差，导致RNA易降解，给后续实验带来一定难度；3、采样后，不能裂解并迅速灭活样本，增加了采样后转运人员和实验人员的风险；4、不能直接用于扩增检测，需要进行RNA抽提。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型冠状病毒RNA样本保存液及其制备方法，从而克服现有技术的不足。

本发明的另一目的还在于提供所述新型冠状病毒RNA样本保存液的应用。

为实现前述发明目的，本发明采用的技术方案包括：

本发明实施例提供了一种新型冠状病毒RNA样本保存液，其包括：如下组分：表面活性剂0.1～2v/v％、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液1～100mmol/L、海藻糖0.1～5w/v％、甜菜碱0.2～2mol/L及山梨醇0.5～5w/v％，其余包括溶剂。

在一些优选实施例中，所述表面活性剂包括NP-40，但不限于此。

进一步地，所述新型冠状病毒RNA样本保存液在40℃下能够保持RNA结构完整性10天以上。

本发明实施例还提供了前述新型冠状病毒RNA样本保存液的制备方法，其包括：将表面活性剂、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、海藻糖、甜菜碱、山梨醇及溶剂均匀混合，并调节pH值至5.8～7.0，过滤，获得所述新型冠状病毒RNA样本保存液。

相应的，本发明实施例还提供了一种新型冠状病毒RNA样本的保存方法，其包括：

将待保存的新型冠状病毒RNA样本置于前述的新型冠状病毒RNA样本保存液中，混匀，保存。

本发明实施例还提供了一种新型冠状病毒RNA样本的保存装置，其包括装置本体，以及设置于所述装置本体内的前述的新型冠状病毒RNA样本保存液。

综上，本发明提供的新型冠状病毒RNA样本保存液的配方组合能够在快速裂解病毒释放RNA的同时，稳定RNA结构，对其形成保护，在高温下放置10天后仍然能够保持RNA的完整性。本配方组合能够直接用于RT-PCR扩增，各组分不会对扩增过程产生抑制，免去了RNA的抽提，使对病毒的检测步骤更简单，时间更短。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：