[发明专利]一种沙棘中5-羟色胺和白藜芦醇的检测方法

权利要求书

1.一种沙棘中5-羟色胺和白藜芦醇的检测方法，其特征在于，以沙棘果肉、叶片和枝条为原料，采用超声提取法提取沙棘样品中5-羟色胺和白藜芦醇并初步纯化后，对样品进行硅烷化处理，利用全扫描模式下特征离子定量气相色谱质谱联用技术(GC-MS)进行测定；

所述样品的提取制备步骤如下：

(1)将沙棘样品粉碎后，加入乙醇水溶液室温放置一段时间，使沙棘样品粉充分浸泡；

(2)将沙棘样品粉溶液超声提取，得到超声提取物后过滤，得到沙棘样品提取液；

(3)将沙棘样品提取液进行减压浓缩，加入乙酸乙酯和蒸馏水进行萃取，得到沙棘样品萃取液；

(4)将沙棘样品萃取液减压浓缩，得到沙棘样品提取物；

(5)向沙棘样品提取物加入吡啶溶解，再加入六甲基二硅胺烷和三甲基氯硅烷进行衍生化处理后，离心，取上清液，得到最终沙棘样品；

所述全扫描模式下选择的特征离子：5-羟色胺硅烷化物质用于定量的特征离子为m/z248，白藜芦醇硅烷化物质用于定量的特征离子为m/z444。

2.根据权利要求1所述的一种沙棘中5-羟色胺和白藜芦醇的检测方法，其特征在于，采用型号为0.25mmx30mx0.25μm的Rtx-5MS毛细管色谱柱进行检测；载气为高纯氦气，流速为0.8mL/min，分流比为25:1，进样口温度为280℃；质谱接口温度为280℃，电离方式为电子轰击源(EI)，离子能量70eV，离子源温度200℃。

3.根据权利要求1所述的一种沙棘中5-羟色胺和白藜芦醇的检测方法，其特征在于，GC-MS的升温程序：初温180℃，保持2min，以每分钟6℃升到200℃，保持6min，以每分钟25℃升到280℃，保持16min；监测方式选取全扫描模式(Full Scan)，质核比33-500。

4.根据权利要求1所述的一种沙棘中5-羟色胺和白藜芦醇的检测方法，其特征在于，采用外标法，分别吸取5-羟色胺和白藜芦醇标准品溶液以及样品注入气相色谱质谱联用仪，以峰面积计算相应样品中5-羟色胺和白藜芦醇的含量。

5.根据权利要求1所述的一种沙棘中5-羟色胺和白藜芦醇的检测方法，其特征在于，

步骤(1)中，所述沙棘样品与乙醇水溶液体积比值为1:100-1:200，所述沙棘样品质量单位为克，所述乙醇水溶液体积分数为70-90％，所述室温放置一段时间为8-12小时；

步骤(2)中超声提取次数为两次；

步骤(3)、(4)中所述减压浓缩的条件为40-45℃，0.05MPa～0.1MPa；

步骤(5)衍生化具体为：加入1mL吡啶溶解沙棘枝条提取物，超声5min使其溶解，置于冰水浴中，依次加入0.4mL六甲基二硅胺烷、0.2mL三甲基氯硅烷，加入硅烷化试剂后样品总体积为1.6mL； 20℃静置30min；离心具体操作为8000rpm离心10min，取上清液用于GC-MS分析。