[发明专利]一种蓝莓多糖BBP0-2的提取分离纯化方法

说明书

本申请公开了一种蓝莓多糖BBP0‑2的提取分离纯化方法，所述方法包括以下步骤：步骤1、称取蓝莓50g，将速冻果实融化后打浆，溶于蒸馏水中，微波消解仪辅助提取；步骤2、取出后用纱布过滤，滤液在5000r/min条件下离心10min。加水，重复上述步骤提取；步骤3、将2次提取的上清液合并，通过旋转蒸发使其体积浓缩至最小；步骤4、加入乙醇，使乙醇体积分数达80%，静置8h；步骤5、再次在5000r/min离心10min，收集沉淀；步骤6、依次用丙酮、乙醚和无水乙醇进行3次洗涤脱脂，将沉淀真空干燥24h，得到蓝莓粗多糖。该方法选取液料比、微波功率、微波提取时间为3个主要影响因素为研究对象，以提取率为评价指标，选择各因素最适宜范围。

技术领域

本发明属于天然产物提取领域，涉及一种蓝莓多糖BBP0-2的提取分离纯化方法。

背景技术

蓝莓(blueberry)又名越橘、蓝浆果，为杜鹃花科越橘属植物，原产于美国弗罗里达州北部，现广泛分布于北半球。蓝莓中含有非常丰富的营养成分，被誉为“浆果之王”，其果实中含有的物质具有抗衰老、缓解视疲劳、改善记忆力、抗氧化、抗癌症等功效，被联合国粮农组织列为人类五大健康食品之一。多糖作为大分子生物在自然界中广泛分布，研究表明，多糖具有抗病毒、抗肿瘤、抗炎症、抗衰老以及降血糖等功能，这些生理活性与结构紧密相关，应用现代科技多种手段联合分析鉴定多糖结构的研究已经实现，但目前对蓝莓多糖分离纯化及鉴定的研究相对较少。

本技术方法对微波辅助法提取的蓝莓多糖进行研究，经过DEAE-52纤维素离子交换柱和Sephadex G-100凝胶柱分离纯化，得到均一多糖组分，通过高效液相色谱鉴定其纯度，并应用气相色谱法对其单糖组成进行分析，为进一步研究蓝莓多糖的生理活性及其开发利用提供参考。

发明内容

本发明的目的是提供一种蓝莓多糖BBP0-2的提取分离纯化方法，为研究蓝莓多糖的生理活性及其开发利用提供参考。

本发明的方法，包括以下步骤：

步骤1、称取蓝莓50g，将速冻果实融化后打浆，溶于蒸馏水中，微波消解仪辅助提取；

步骤2、取出后用纱布过滤，滤液在5000r/min条件下离心10min。加水，重复上述步骤提取；

步骤3、将2次提取的上清液合并，通过旋转蒸发使其体积浓缩至最小；

步骤4、加入乙醇，使乙醇体积分数达80%，静置8h；

步骤5、再次在5000r/min离心10min，收集沉淀；

步骤6、依次用丙酮、乙醚和无水乙醇进行3次洗涤脱脂，将沉淀真空干燥24h，得到蓝莓粗多糖。

步骤1所述微波提取功率为500W，提取时间为25min。

步骤2中固定液料比为1：7g/ml。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1

称取蓝莓50g，将速冻果实融化后打浆，溶于蒸馏水中，微波消解仪辅助提取，微波功率分别为400w、500w、600w，微波提取时间为25min；取出后用纱布过滤，液料比为1：7g/ml，滤液在5000r/min条件下离心10min。加水，重复上述步骤提取；将2次提取的上清液合并，通过旋转蒸发使其体积浓缩至最小；加入乙醇，使乙醇体积分数达80%，静置8h；再次在5000r/min离心10min，收集沉淀；依次用丙酮、乙醚和无水乙醇进行3次洗涤脱脂，将沉淀真空干燥24h，得到蓝莓粗多糖。 随着微波功率的增加，蓝莓多糖的提取量也随之呈现上升趋势；当微波功率在200～500W之间时，随着微波功率的增大，多糖提取量显著提高，当微波功率达到500W后，随着微波功率继续增加时，多糖提取量上升变化不明显，故采用最佳微波功率为500W。

实施例2