[发明专利]一种软骨膜片及其制备方法有效
| 申请号: | 202011213510.9 | 申请日: | 2020-11-04 |
| 公开(公告)号: | CN112370573B | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
| 发明(设计)人: | 程蕊苹 | 申请(专利权)人: | 山东佰傲干细胞生物技术有限公司 |
| 主分类号: | A61L27/38 | 分类号: | A61L27/38;A61L27/50;A61L27/54 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 264199 山东省烟*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 软骨 膜片 及其 制备 方法 | ||
1.一种软骨膜片,其特征在于,通过诱导脐带间充质干细胞和软骨细胞制备而成;
诱导步骤为:将脐带间充质干细胞和软骨细胞混合后,采用软骨细胞诱导液进行软骨诱导培养,诱导30天后,形成软骨膜片;
所述脐带间充质干细胞与软骨细胞混合的数量比为7:1;
所述软骨细胞诱导液的组成为:在DMEM培养液含有体积含量为2.5~10%的人血来源的浓缩生长因子、10-3~10-5mol/mL地塞米松、5~30ng/mLTGF-b、0.1~10ug/mL胰岛素、10~80ug/mL维生素C;
所述软骨膜片制备过程具体包括如下步骤:
(1)将脐带间充质干细胞和软骨细胞按照数量比为7:1混合后,按照接种密度为1E4~1E5/cm 2接种于细胞培养板中;
(2)待细胞生长密度融合至80%~90%时,加入软骨细胞诱导液进行软骨诱导培养;
软骨细胞诱导液的组成为:在DMEM培养液含有体积含量为2.5~10%的人血来源的浓缩生长因子、10-3~10-5mol/mL地塞米松、5~30ng/mLTGF-b、0.1~10ug/mL胰岛素、10~80ug/mL维生素C;
(3)诱导30天后,形成软骨膜片。
2.如权利要求1所述的软骨膜片,其特征在于,步骤(1)软骨细胞来自人、猴、猪、马、兔、大鼠或小鼠。
3.如权利要求2所述的软骨膜片,其特征在于,步骤(1)软骨细胞选自人耳软骨、鼻中隔、肋软骨或关节软骨。
4.如权利要求1所述的软骨膜片在制备组织工程化软骨组织中的应用。
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