[发明专利]一种同时测定祛痘组合物中不同特征成分的HPLC检测方法在审
申请号: | 202011209945.6 | 申请日: | 2020-11-03 |
公开(公告)号: | CN112415109A | 公开(公告)日: | 2021-02-26 |
发明(设计)人: | 刘林峰;吴知情 | 申请(专利权)人: | 广州那比昂生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/34 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋 |
地址: | 510663 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 测定 组合 不同 特征 成分 hplc 检测 方法 | ||
1.一种同时测定祛痘组合物中不同特征成分的HPLC检测方法,其特征在于,所述HPLC检测方法包括以下步骤:将祛痘组合物配制成样品,之后经HPLC检测梯度洗脱,得到检测结果,之后利用标准曲线计算特征组分含量;
所述特征成分包括绿原酸、咖啡酸、龙胆苦苷、小檗碱、黄芩苷或大黄素中任意一种或至少两种的组合。
2.根据权利要求1所述的同时测定祛痘组合物中不同特征成分的HPLC检测方法,其特征在于,所述梯度洗脱的溶剂为甲醇和磷酸超纯水溶液;
优选地,所述磷酸超纯水溶液的质量分数为0.03-0.08%。
3.根据权利要求1或2所述的同时测定祛痘组合物中不同特征成分的HPLC检测方法,其特征在于,所述梯度洗脱按以下程序进行:第0min时洗脱液中甲醇的体积占比为10%,磷酸超纯水溶液的体积占比为90%,之后匀速变化至第6min时甲醇的体积占比为25%,磷酸超纯水溶液的体积占比为75%,之后匀速变化至第15min时甲醇的体积占比为30%,磷酸超纯水溶液的体积占比为70%,之后匀速变化至第21min时甲醇的体积占比为40%,磷酸超纯水溶液的体积占比为60%,之后匀速变化至第27min时甲醇的体积占比为55%,磷酸超纯水溶液的体积占比为45%,最后匀速变化至第40min时甲醇的体积占比为90%,磷酸超纯水溶液的体积占比为10%。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的同时测定祛痘组合物中不同特征成分的HPLC检测方法,其特征在于,所述将祛痘组合物配制成样品包括以下步骤:将祛痘组合物用纯化水回流提取,之后过滤,取滤液经大孔吸附树脂吸附洗脱,之后蒸发洗脱液、浓缩,用甲醇定容,过膜,得到所述样品;
优选地,所述回流的温度为75-85℃;
优选地,所述回流的时间为50-70min。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的同时测定祛痘组合物中不同特征成分的HPLC检测方法,其特征在于,所述HPLC采用Agilent InfintyLab Poroshell 120SB-C18色谱柱,所述色谱柱的规格为150mm×4.60mm,填料粒径为2.8μm。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的同时测定祛痘组合物中不同特征成分的HPLC检测方法,其特征在于,所述HPLC检测的柱温为35-45℃。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的同时测定祛痘组合物中不同特征成分的HPLC检测方法,其特征在于,所述梯度洗脱的流速为0.8-1.2mL/min。
8.根据权利要求1-6中任一项所述的同时测定祛痘组合物中不同特征成分的HPLC检测方法,其特征在于,所述HPLC检测的进样体积为8-12μL。
9.根据权利要求1-6中任一项所述的同时测定祛痘组合物中不同特征成分的HPLC检测方法,其特征在于,所述HPLC检测的波长为260-300nm。
10.根据权利要求1-6中任一项所述的同时测定祛痘组合物中不同特征成分的HPLC检测方法,其特征在于,所述标准曲线由以下步骤得到:取特征成分的标准样品用甲醇溶解稀释,之后按照所述梯度洗脱程序进行HPLC检测,根据检测结果计算标准曲线。
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