[发明专利]气肿疽梭菌专用培养基及其制备方法和兽用气肿疽灭活疫苗的制备方法

说明书

本发明提供了一种气肿疽梭菌专用培养基及其制备方法和兽用气肿疽灭活疫苗的制备方法，属于兽用生物制品技术领域。本发明提供的气肿疽梭菌专用培养基，包括以下质量份的组分：蛋白胨10～15份、胰蛋白胨3～5份、酪蛋白胨3～5份、酵母浸粉1～3份、NaCl 1～3份、KH₂PO₄ 1～3份、Na₂HPO₄·12H₂O 10～20份和无水葡萄糖5～10份。本发明提供的气肿疽梭菌专用培养基不仅取材方便，质优价廉，而且性能稳定，克服了传统培养基的诸多弊端，适于兽用气肿疽灭活疫苗的大规模生产。

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种气肿疽梭菌专用培养基及其制备方法和兽用气肿疽灭活疫苗的制备方法。

背景技术

气肿疽俗称鸣疽，也叫黑腿病，是由气肿疽梭菌(Clostridium chauvoei)引起的急性败血性人畜共患细菌传染病。气肿疽梭菌及其芽孢经由破损的皮肤进入体内，或者经由胃肠道侵入受损的消化道黏膜内，在体内大量繁殖产生透明质酸酶和毒素，使受侵害组织出现高度充血、出血及血浆渗出的症状，病情严重时其产生的毒素会阻碍中枢神经机能的运行，导致致死性毒血症或菌血症的发生。该病多发于牛羊等反刍动物，给我国畜牧养殖行业带来了巨大的经济损失。

目前，我国用于预防该疫病的疫苗是气肿疽灭活疫苗(甲醛苗、明矾苗)。业内制备气肿疽灭活疫苗仍使用以牛肉、牛肝等动物性原材料来制备厌气肉肝汤(明矾苗)、蛋白胨肉肝汤(甲醛苗)培养基，且大生产时常需加入10％左右肝块。使用这种方法制备培养基，因原材料质量参差不齐、批间差异大，残留的肝组织不易去除，常常出现毒力不稳定、成品苗保护差的现象，尤其是近几年由于国内乳品业的发展，奶牛饲养量急速增加，随之而来大量的淘汰奶牛肉充斥市场更造成制备疫苗培养基的原材料质量下降；同时，牛肉、牛肝中残留的药物也常常会抑制细菌生长，以上种种情况严重影响了疫苗的质量；另外，传统培养基制备过程繁琐、耗时长、需要人力多，价格高昂、回收率低，不宜在洁净生产场所制备，给疫苗生产带来了巨大的浪费和高额的成本，给疫苗生产企业造成极大困扰。因此，急需一种取材方便，质优价廉，性能稳定的气肿疽梭菌培养基与培养方法与之相适应。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种气肿疽梭菌专用培养基及其制备方法和兽用气肿疽灭活疫苗的制备方法。本发明提供的气肿疽梭菌专用培养基不仅取材方便，质优价廉，而且性能稳定，克服了传统培养基的诸多弊端，适于兽用气肿疽灭活疫苗的大规模生产。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供了一种气肿疽梭菌专用培养基，包括以下质量份的组分：蛋白胨10～15份、胰蛋白胨3～5份、酪蛋白胨3～5份、酵母浸粉1～3份、NaCl 1～3份、KH₂PO₄ 1～3份、Na₂HPO₄·12H₂O 10～20份和无水葡萄糖5～10份。

优选的，所述气肿疽梭菌专用培养基还包括水。

优选的，当所述培养基包括水时，每升所述培养基包括以下质量的组分：蛋白胨10～15g、胰蛋白胨3～5g、酪蛋白胨3～5g、酵母浸粉1～3g、NaCl 1～3g、KH₂PO₄ 1～3g、Na₂HPO₄·12H₂O 10～20g和无水葡萄糖5～10g。

优选的，所述气肿疽梭菌专用培养基的pH值为7.6～7.8。

本发明提供了上述气肿疽梭菌专用培养基的制备方法，包括如下步骤：

对由无水葡萄糖配制成葡萄糖水溶液进行灭菌，得到气肿疽梭菌专用培养基A溶液；