[发明专利]一种水稻新品种抗病性鉴定方法及系统

权利要求书

1.一种水稻新品种抗病性鉴定方法，其特征在于，所述水稻新品种抗病性鉴定方法包括以下步骤：

步骤一，田间成株期以自然诱发结合接种鉴定：以田间病稻草为诱发材料，经高施N肥，创造发病条件，并结合人工接种在六月中下旬分蘖高峰期将混合孢子液用喷雾器喷洒在水稻叶片上，并辅助遮阳处理，通过稻瘟病自然诱发模块创造利于稻瘟病发病条件，并于7月上旬调查叶瘟病情指数，于8月15至9月1日调查穗颈瘟病情；

步骤二，通过稻瘟病标样采集模块在7月初至10月初稻瘟病发生的季节，采集水稻种植区的稻瘟病标样，进行稻瘟病菌生理小种收集与鉴别；

步骤三，通过稻瘟病标样分离模块将稻瘟病标本将在实验室内进行组织分离、纯化得到单孢菌株，将稻瘟病标本在恒温中保湿培养24-48h，并在超净环境下镜检观察是否有稻瘟病，待病斑上产生孢子时，将孢子抖落在水琼脂平板培养基上，在25℃恒温箱中保湿培养16h；

步骤四，在超净环境显微镜下用手术刀挑取单个孢子，接种到PDA培养基上，25℃保湿培养3-5d，培养至长至直径2cm，再次转入稻谷粉培养基中25℃保湿培养3-5d，同样剔除掉污染菌株，将标本每只分离3-5个单孢菌株；分离提纯菌株多份，淘汰菌株中污染的和产孢能力低的菌株，保存有效菌株；

步骤五，将分离获得的单孢菌株接种到产孢培养基上，存入恒温培养箱直至干燥，无菌环境装入灭菌的冻存管中，将冻存管按编号装入密封容器中，通过稻瘟病标样保存模块将单孢菌株放入-20℃的冰箱暂时保存备用；

步骤六，区域试验稻瘟病菌生理小种田间鉴定：通过生理小种鉴定模块分别进行实验基地区域试验和品比试验，明确本区优势生理小种；单孢在提纯复壮后来年利用收集的不同类型的鉴别寄主分别对不同地区不同品种稻瘟病菌进行生理小种的种类和致病力测定，通过侵染鉴别寄主探明稻瘟病菌生理小种组成及分布，确定本区优势生理小种；

步骤七，通过中央控制模块利用中央处理器控制所述水稻新品种抗病性鉴定系统各个模块的正常运行；通过数据融合处理模块利用数据融合程序将获取的稻瘟病自然诱发数据、稻瘟病标样数据以及生理小种鉴定结果进行融合处理，获得稻瘟病数据；

步骤八，病情记载分级及抗性评价及标准计算：通过指数计算模块利用计算程序根据获得的稻瘟病数据分别计算苗叶瘟病级、穗瘟发病率、穗瘟损失率以及稻瘟病综合指数；

步骤九，通过数据存储模块利用存储器存储获取的稻瘟病自然诱发数据、稻瘟病标样数据、生理小种鉴定结果、融合处理后的稻瘟病数据以及计算结果；

步骤十，通过更新显示模块利用更新程序对获取的稻瘟病自然诱发数据、稻瘟病标样数据、生理小种鉴定结果、融合处理后的稻瘟病数据以及计算结果进行更新，并通过显示器进行数据的实时显示。

2.如权利要求1所述的水稻新品种抗病性鉴定方法，其特征在于，步骤一中，在水稻秧苗3叶期时，在接种箱内对供试品种和鉴别寄主喷雾接种，接种后置于接种箱内放置24h移入遮荫棚内，白天每隔1h喷水5min保湿，晚上加盖薄膜保温，接种后8d，分析发病情况。

3.如权利要求1所述的水稻新品种抗病性鉴定方法，其特征在于，步骤二中，所述稻瘟病病害标本的采集方法为：采集地点分布在灌区43个地点，采集标本531份，采集的穗颈瘟、节瘟标本，标统一编号，分类保存。

4.如权利要求1所述的水稻新品种抗病性鉴定方法，其特征在于，步骤六中，所述区域试验稻瘟病菌生理小种田间鉴定方法还包括：

利用24个单基因鉴别稻瘟病菌，利用不同类型的鉴别寄主在三叶一心是在无菌高温高湿的环境下侵染鉴别，确定生理小种和对单基因鉴别寄主的抗感反应；鉴定过程需要注意菌株孢子扩繁时间要和鉴别寄主的生长时间的把握，分多期多次育苗，育苗时种子要使用402浸种，以及床土的消毒，以及侵染环境的规范建立。

5.如权利要求1所述的水稻新品种抗病性鉴定方法，其特征在于，步骤八中，所述苗叶瘟病级按GLB＝∑(NDL×GDL)/TNL计算；

式中：GLB-苗叶瘟病级；

NDL-各级病叶数；

GDL-各病级代表值；

TNL-调查总叶数。