[发明专利]一种表达调控元件及其应用

说明书

本发明提供了一种表达调控元件及其应用，具体地，涉及表达调控元件及其在调控一个或多个基因在细胞中的表达中的用途，本发明还公开了表达调控元件在植物育种中的应用。本发明进一步公开了利用本发明表达调控元件提高目标基因表达的方法，所述方法包括将本发明的表达调控元件与目标基因可操作地连接来提高该目标基因的表达。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种表达调控元件及其在调节基因表达中的应用。

背景技术

在作物遗传改良过程中，如何提高部分基因表达的表达量是一直以来需要解决的重要问题之一。顺式作用元件是指与结构基因串联的特定DNA序列，是转录因子的结合位点，通过与转录因子结合而调控基因转录。结合转录因子之后能够增强转录作用的顺式元件被称为增强子。通过在目的基因的调控区添加增强子，或许能够实现在不显著改变基因表达模式的前提下有效提高目的基因表达。

OCS基因在农杆菌中编码章鱼碱合成酶，其启动子部分具有与真核生物启动子相似的TATA box与CAAT box，能在植物细胞中普遍表达，具有植物启动子的特性。OCS启动子部分存在一个重要的16bp回文序列(ACGTAAGCGCTTACGT)，具有显著的增强子活性。分析其他在植物中广泛使用的强启动子序列后发现，还存在其他与OCS具有一定同源性的表达调控元件序列，根据这些序列的特征对OCS元件进行改造，以期筛选能够提高基因表达水平的新的表达调控元件。

发明内容

本发明目的是提供一种表达调控元件及其应用。本发明通过改变野生型增强子序列，设计64条待筛选的表达调控元件，连接到表达载体进行筛选，得到了19种功能增强的表达调控元件，这19种表达调控元件在提高基因表达水平方面有显著效果。

表达调控元件

一方面，本发明提供了一种表达调控元件，所述表达调控元件包含SEQ ID NO:1-64任一所示的核苷酸序列或者与其互补的核苷酸序列。

在一个实施方式中，所述表达调控元件包含SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ IDNO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ IDNO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:44、SEQ IDNO:45、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:51或SEQ ID NO:55中任一所示的多核苷酸序列；优选，SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45或SEQ ID NO:48中任一所示的多核苷酸序列。

在一个实施方式中，所述表达调控元件为SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:44、SEQ IDNO:45、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:51或SEQ ID NO:55中任一所示的多核苷酸序列；优选，SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45或SEQ ID NO:48中任一所示的多核苷酸序列。