[发明专利]一种壳寡糖分离方法

说明书

本发明公开了一种壳寡糖分离方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：取壳寡糖样品加水配制成浓度为0.5‑2mg/mL壳寡糖水溶液；步骤2：取铝制点样板，将壳寡糖水溶液点样在铝制点样板的一端，然后将点样后的铝制点样板置于装有展开剂的层析缸中，待溶剂前进到铝制点样板的另一端后，往铝制点样板上喷洒显色剂，喷洒完成后在40‑60℃条件下烘烤至铝制点样板上的斑点显色清晰即可。该分离方法简单，且分离效果佳，同时成本低廉，同时还可利用该方法对壳寡糖进行鉴别。

技术领域

本发明属于壳寡糖分离领域，尤其涉及一种壳寡糖分离方法。

背景技术

壳寡糖(Chitosan oligosaccharide)，又名寡聚氨基葡糖、甲壳低聚糖，是2～10个氨基葡萄糖通过β-1,4糖苷键连接起来的小分子聚合物，是天然糖中唯一大量存在的碱性氨基多糖，其特征为脱乙酰度90％，聚合度20，平均分子质量3900道尔顿。壳寡糖是壳聚糖的水解产物，其在水中的溶解度好，水溶性好,易被吸收,环保无污染，因此生物可利用度高，具有独特的生理活性和功能，如降胆固醇、抗菌、抗肿瘤和抗癌、抗炎、抗高血压、抗氧化等，可广泛地应用于农业、食品、化工、能源、环保、医药等领域。

目前，对壳寡糖的研究已经越来越深入，根据实验条件的不同，壳寡糖制备过程中氨基葡萄糖会发生不同程度的聚合，进而产生多种不同聚合度的壳寡糖，造成生物性质及其他方面的性质不同，如抗氧化性、抑菌功能等方面，因此分离出适宜的用于研究的壳寡糖纯净样品是非常重要的，对样品的分离需要探索出一种简便、快捷、有效的壳寡糖分析方法很有必要

薄层色谱(Thin Layer Chromatography，TLC)，是层析分离技术的一种。它是将适宜的固定相涂布于支持板上，将样品进行点样后，选用合适的溶剂配制展开剂进行展开，从而达到对混合样品分离、鉴定和定量的目的。薄层色谱法的优点是操作方便、设备简单、易显色、结果直观、展开速率快、兼具分离和鉴定双重功能，同时其成本低、能节省时间、检测手段多、信息来源广等，这是其他色谱方法所不具有的。长期以来，薄层色谱法由于偶尔会出现让人不满意的结果，导致很多人认为这是一种陈旧、过时、不准确的分析手段，应该用更加准确可靠的其他色谱方法进行取代，如高效液相色谱、高效气相色谱等。但这是一种偏见，只要在实际操作中严格遵守操作规范并充分考虑到一切可能影响到结果的因素，并进行适当的调整，就能保证检验结果的准确性，从而提高工作效率和质量。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种对壳寡糖中不同聚合度的壳寡糖进行分离的方法。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：一种壳寡糖分离方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：取壳寡糖样品加水配制成浓度为0.5-2mg/mL壳寡糖水溶液；

步骤2：取铝制点样板，将壳寡糖水溶液点样在铝制点样板的一端，然后将点样后的铝制点样板置于装有展开剂的层析缸中，待溶剂前进到铝制点样板的另一端后，往铝制点样板上喷洒显色剂，喷洒完成后在40-60℃条件下烘烤至铝制点样板上的斑点显色清晰即可。

优选的，所述步骤2中的取样量均为1μL。

优选的，所述展开剂为正丁醇-蒸馏水-冰乙酸-氨水按照10:5:5:1的体积比混合均匀即得。

优选的，所述显色剂浓度为0.5wt％的茚三酮溶液。

优选的，所述茚三酮溶液由茚三酮、正丁醇和冰乙酸混合而成，其中，茚三酮与正丁醇的质量体积比为37.5g/L，正丁醇与冰乙酸的体积比为100:3。

优选的，所述步骤1中壳寡糖水溶液的浓度为1mg/mL。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：该分离方法简单，且分离效果佳，同时成本低廉，同时还可利用该方法对壳寡糖进行鉴别。

附图说明