[发明专利]一种通用型核酸检测器件及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种通用型核酸检测器件,其特征在于，包括：

三层结构，从上到下依次为：碳纳米管CNT层、SiO₂层和基底层，其中碳纳米管CNT上修饰有CW多肽，CW多肽的序列为：Fmoc-RRMEHRMEWC。

2.如权利要求1所述的通用型核酸检测器件,其特征在于：

其中，碳纳米管CNT层两侧以Ti为金属电极，中间的沟道内部均匀的分布着碳纳米管薄膜晶体管。

3.一种通用型核酸检测器件的制备方法，其特征在于：

步骤一：制备CNT-TFT电学器件，沟道内部具有均匀分布的碳纳米管；

步骤二：将第一预定量的N-1-芘马来酰亚胺溶液与制备好的CNT-TFT电学器件在常温下孵育第一预定时间，使用DMF和ddH₂O交替清洗后，用第二预定量的CW多肽溶液，CW多肽的序列为：Fmoc-RRMEHRMEWC，在常温下孵育第二预定时间，

步骤三：用ddH₂O清洗，然后干燥。

4.如权利要求1所述的多肽化修饰的CNT-TFT电学器件在通用型核酸检测中的用途。

5.如权利要求4所述的多肽化修饰的CNT-TFT电学器件在通用型核酸检测中的用途，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一：取一系列不同浓度的核酸标准溶液，分别与多肽CNT-TFT器件孵育，得到相应的ΔIon信号响应，然后用Hill-Langmuir模型拟合DNA浓度与ΔIon响应之间的关系，得到拟合的公式；

步骤二：核酸样品的制备：依据与目的核酸相适应的制备方案，得到核酸样品；

步骤三：将得到的核酸样品，稀释后与多肽CNT-TFT器件孵育，使用半导体器件分析仪分析ΔIon响应，并代入步骤一拟合的公式中，计算得到核酸含量。

6.如权利要求5所述的用途，其特征在于：

其中，所述核酸为DNA或RNA。

7.如权利要求5所述的用途，其特征在于：

其中，所述核酸为cDNA。

8.如权利要求5所述的用途，其特征在于：

当用于检测细胞中的cDNA含量时，步骤如下：

步骤一：取一系列不同浓度的DNA标准溶液，分别与多肽CNT-TFT器件孵育，得到相应的ΔIon信号响应，然后用Hill-Langmuir模型拟合DNA浓度与ΔIon响应之间的关系，得到拟合的公式；

步骤二：细胞cDNA样品的制备：取生长状态良好的细胞，加入预定量的TRIzol试剂，在常温下混合均匀，放置5min，然后加入100μl的氯仿，再放置5min后，4℃离心，然后将上清液转移到无核酸酶的EP管中，加入等量的异丙醇，在冰上孵育10min，然后4℃离心，收集沉淀，并用75％的乙醇洗涤一遍，放在冰上干燥10min后，加入DEPC处理水溶解，然后取1-2μl溶解后的溶液，加入Oligo-dT，在65℃下孵育5min，然后立刻放到冰上，然后在体系中依次加入dNTP、反转录酶和反转录缓冲液，用PCR仪器进行PCR反应，即可得到细胞的cDNA样品；

步骤三：将得到的细胞的cDNA样品，稀释后与多肽CNT-TFT器件孵育，使用半导体器件分析仪分析ΔIon响应，并代入之前拟合的公式中，计算得到细胞的cDNA含量。