[发明专利]一种间充质干细胞来源的抗炎症氧化脂质组合物的制备方法

权利要求书

1.一种间充质干细胞来源的抗炎症氧化脂质组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）分离并培养获得间充质干细胞；

2）将步骤1）获得的间充质干细胞贴壁培养24h后，然后加入免疫激活的外周血单个核细胞或其条件培养基共培养1~3天，得到预激活的间充质干细胞；

3）向预激活的间充质干细胞中加入合成氧化脂质所需的底物，继续培养1～3天，收集细胞，经细胞萃取，即得到氧化脂质组合物。

2.根据权利要求1所述间充质干细胞来源的抗炎症氧化脂质组合物的制备方法，其特征在于，所述间充质干细胞来源于人脂肪、牙髓、骨髓、脐带、胎盘或脐带血；所述外周血单个核细胞来源于人外周血。

3.根据权利要求1所述间充质干细胞来源的抗炎症氧化脂质组合物的制备方法，其特征在于，所述分离并培养获得间充质干细胞包括：采集样本组织进行洗涤；然后将分离出的组织块置于生理盐水中洗涤，并剪碎、称重，酶解后转入离心管中离心，弃上清液；再向离心管中加入MSCs培养基，培养一段时间，当原代细胞培养至79~80％融合，消化解离并进行传代培养2-7代，获得间充质干细胞。

4.根据权利要求1所述间充质干细胞来源的抗炎症氧化脂质组合物的制备方法，其特征在于，所述免疫激活的外周血单个核细胞与间充质干细胞的数量比10:1。

5.根据权利要求1所述间充质干细胞来源的抗炎症氧化脂质组合物的制备方法，其特征在于，所述外周血单个核细胞是通过加入植物血凝素来免疫激活，所述植物血凝素的终浓度为2～10 µg/mL。

6.根据权利要求1所述间充质干细胞来源的抗炎症氧化脂质组合物的制备方法，其特征在于，所述底物为花生四烯酸、二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸中的一种或多种。

7.根据权利要求1所述间充质干细胞来源的抗炎症氧化脂质组合物的制备方法，其特征在于，所述培养条件是在37°C、５％二氧化碳以及饱和湿度。

8.一种如权利要求1~7任一项所述方法得到的氧化脂质组合物在制备预防或治疗自身免疫性疾病、炎症性和组织修复相关疾病的药物中的应用。

9.根据权利要求8所述应用，其特征在于，所述自身免疫性疾病包括类风湿性关节炎、硬皮病、系统性红斑狼疮、强直性脊柱炎、重症肌无力和多发性溃疡性结肠炎等中的至少一种；所述炎性相关疾病包括脓毒症、退行性关节炎和新生儿支气管肺发育不良性肺炎等中的至少一种。

10.一种用于治疗炎症性疾病的药学组合物，其特征在于，包含权利要求1所述的预激活的间充质干细胞作为有效成分。