[发明专利]一种疫苗保护剂

说明书

本发明公开了一种疫苗保护剂，所述保护剂由如下成分组成：2.5～5％m/v蔗糖，2.5～5％m/v麦芽糖、0.3％～0.5％m/v尿素、1％～3％m/v右旋糖苷40，余量为NaCl含量为0.2～0.9％m/v的磷酸盐缓冲液。该保护剂可有效提高疫苗的热稳定性，减少冻干活性损失，且未添加海藻糖，降低了成本。

技术领域

本发明属于生物制品领域。

背景技术

灭活病毒疫苗是目前狂犬病疫苗的主要类型，其生产主要包括：体外培养扩繁狂犬病病毒、灭活病毒、纯化病毒、加入疫苗保护剂、冻干等步骤。

疫苗保护剂，在冻干前病毒液的储存、冻干过程、以及冻干后储存阶段，均对疫苗活性起到不可缺少的保护作用。

李春艳等通过改变海藻糖、右旋糖酐40、人血白蛋白等3种保护剂主要成分的含量，确定最佳冻干保护剂配方为4％海藻糖、3％右旋糖酐40、1％蔗糖、0.5％甘露醇、2％人血白蛋白，使狂犬病疫苗半成品冻干过程效价平均下降7.8％，热稳定效力下降15.6％，冻干品在12个月内无大幅下降。并认为：海藻糖能降低冻干过程对病毒包膜的伤害作用，海藻糖的羟基与蛋白质中的极性基团形成氢键，从而代替蛋白质极性基团周围和磷脂中的水分子，使蛋白质周围形成水化膜，稳定蛋白质的高级结构，防止蛋白质因冻干而变性，使疫苗在低温冷冻和干燥失水的情况下，仍保持结构与功能的完整性(冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)冻干保护剂的筛选，中国生物制品学杂志2017年3月第30卷第3期)。

但海藻糖的成本较高，且需要较高浓度才能起作用，因此，增加了疫苗生产的成本。

发明内容

本发明的目的是：提供一种无海藻糖的新的狂犬病疫苗保护剂。

本发明的技术方案如下：

一种疫苗保护剂，所述保护剂由如下成分组成：

2.5～5重量份蔗糖，2.5～5重量份麦芽糖、0.3～0.5重量份尿素、1～3重量份右旋糖苷40。

如前述的保护剂，所述保护剂由如下成分组成：

2.5重量份蔗糖，2.5％重量份麦芽糖、0.3重量份尿素、3重量份右旋糖苷40。

前述的疫苗保护剂在制备狂犬病疫苗中的用途。

如前述的用途，所述狂犬病疫苗为冻干人用狂犬病疫苗。

一种灭活疫苗冻干粉制剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)将前述疫苗保护剂溶于NaCl含量为0.2％～0.9％(w/v)的磷酸缓冲液，加入灭活和纯化后的病毒液，使所得混合物中蔗糖终浓度为2.5％～5％(m/v)；

(2)冷冻干燥。

如前述的制备方法，步骤(1)中，所得混合物中蔗糖终浓度为2.5％(m/v)、麦芽糖终浓度为2.5％(m/v)、尿素终浓度为0.3％(m/v)、右旋糖酐40终浓度为3％(m/v)。

如前述的制备方法，所述病毒是以无血清培养基培养的Vero细胞为宿主生产得到的。

如前述的制备方法，所述病毒是狂犬病病毒。

如前述的制备方法，所述病毒为狂犬病病毒固定毒rPV-2061株。

本发明还提供了前述方法制备得到的灭活疫苗冻干粉制剂。

本发明的有益效果：

本发明的疫苗保护剂组分简单，无需海藻糖，即可对疫苗效价进行有效保护，添加了本发明的保护剂后，冻干后效价与冻干前效价相比几乎不变。