[发明专利]用于真姬菇担孢子显微观察的固定液、制备方法、固定方法及应用有效
| 申请号： | 202011134075.0 | 申请日： | 2020-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN112284861B | 公开（公告）日： | 2023-02-17 |
| 发明（设计）人： | 万佳宁;周陈力;鲍大鹏;杨瑞恒;李燕;龚明;王莹;陈洪雨;候娣 | 申请（专利权）人： | 上海市农业科学院 |
| 主分类号： | G01N1/30 | 分类号： | G01N1/30;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 张金铭 |
| 地址： | 201100 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 真姬菇担 孢子 显微 观察 固定 制备 方法 应用 | ||
1.一种真菌担孢子的观察方法，其特征在于，观察步骤包括，抽取固定液与真菌担孢子混合均匀，凝固后置于光聚焦显微镜下观察；
所述固定液的制备方法为：将明胶加入到甘油水合剂中加热至50～65℃使明胶融化，而后混匀得到固定液；
所述甘油水合剂中甘油和水的体积比为1:1；
所述明胶与甘油水合剂的质量体积比为1:2.5～5。
2.根据权利要求1所述的观察方法，其特征在于，所述加热的温度为60℃。
3.根据权利要求1所述的观察方法，其特征在于，所述真菌包括平菇、草菇或真姬菇。
4.根据权利要求1～3任一项所述的观察方法，其特征在于，所述真菌担孢子在与固定液混合之前，还包括染色步骤。
5.根据权利要求4所述的观察方法，其特征在于，所述染色步骤包括向真菌担孢子中加入染色剂，避光保存。
6.根据权利要求5所述的观察方法，其特征在于，所述染色剂包括VBL、苯胺蓝或calcofluor white。
7.根据权利要求4所述的观察方法，其特征在于，所述真菌担孢子在染色之后经过清洗。
8.根据权利要求7所述的观察方法，其特征在于，所述清洗步骤包括使用无菌水和/或PBS缓冲液洗涤后离心，去除上清液。
9.根据权利要求1所述的观察方法，其特征在于，所述固定有真菌担孢子的固定液中，真菌担孢子浓度为103～106个/ml。
10.权利要求1～9任一项所述观察方法在真菌担孢子质量评价中的应用。
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