[发明专利]捕获和/或计数细胞的微流控芯片及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种捕获和/或计数细胞的微流控芯片，其特征在于，包括：

第一基层；

抗体修饰的反蛋白石光子晶体结构，设置在所述第一基层上，其包括抗体修饰层以及双层掺杂有Yb³⁺和Er³⁺的钒酸钇反蛋白石结构层；

第二基层，设置在所述第一基层靠近所述抗体修饰的反蛋白石光子晶体结构的一侧；以及

微流控腔，设置在所述第一基层与所述第二基层之间；

所述微流控芯片的制备方法包括以下步骤：

取一第一基层，并在第一基层上设置双层带隙不同的聚甲基丙烯酸甲酯光子晶体；

将掺杂有Yb³⁺和Er³⁺的钒酸钇前驱体溶液渗入到上述设置有双层带隙不同的聚甲基丙烯酸甲酯光子晶体的第一基层的光子晶体的缝隙中，并经煅烧处理，消除聚甲基丙烯酸甲酯光子晶体，以在第一基层上形成双层掺杂有Yb³⁺和Er³⁺的钒酸钇反蛋白石结构层；

将双层掺杂有Yb³⁺和Er³⁺的钒酸钇反蛋白石结构层依次置于3-巯基丙基三甲氧基硅烷溶液、N-(4-马来酰亚胺丁酰基氧)琥珀酸亚胺溶液、链霉亲和素溶液以及生物素化的抗体溶液中进行修饰处理，形成抗体修饰层，得到设置在第一基层上的抗体修饰的反蛋白石光子晶体结构；

取一第二基层，将设置有抗体修饰的反蛋白石光子晶体结构的第一基层与第二基层进行隔离，以形成微流控腔，然后进行封装处理，得到所述微流控芯片。

2.根据权利要求1所述的一种捕获和/或计数细胞的微流控芯片，其特征在于，所述步骤，在第一基层上设置双层带隙不同的聚甲基丙烯酸甲酯光子晶体的方法具体包括：

取两组第一基层，将两组第一基层分别置于两组粒度不同的聚甲基丙烯酸甲酯溶液进行处理后，再经烘干处理，得到两组分别附有不同带隙的聚甲基丙烯酸甲酯光子晶体的第一基层；

用氯化钠溶液对其中一组附有聚甲基丙烯酸甲酯光子晶体的第一基层上的聚甲基丙烯酸甲酯光子晶体进行剥离，然后用另一组附有聚甲基丙烯酸甲酯光子晶体的第一基层吸附被剥离出的聚甲基丙烯酸甲酯光子晶体，并经烘干处理，得到设置有双层带隙不同的聚甲基丙烯酸甲酯光子晶体的第一基层。

3.根据权利要求1所述的一种捕获和/或计数细胞的微流控芯片，其特征在于，所述步骤中，掺杂有Yb³⁺和Er³⁺的钒酸钇前驱体溶液是由硝酸溶液、去离子水、偏钒酸铵、柠檬酸、硝酸钇、硝酸镱和硝酸铒混合配制而成。

4.根据权利要求3所述的一种捕获和/或计数细胞的微流控芯片，其特征在于，所述偏钒酸铵、硝酸钇、硝酸镱和硝酸铒的摩尔比为30:(7~9):(1.5~2.5):(0.05~0.15)。

5.根据权利要求1所述的一种捕获和/或计数细胞的微流控芯片，其特征在于，所述步骤中，煅烧处理的温度为500~600℃。

6.根据权利要求1所述的一种捕获和/或计数细胞的微流控芯片，其特征在于：

所述3-巯基丙基三甲氧基硅烷溶液为3-巯基丙基三甲氧基硅烷的乙醇溶液，其体积浓度为3%~5%；

所述N-(4-马来酰亚胺丁酰基氧)琥珀酸亚胺溶液为N-(4-马来酰亚胺丁酰基氧)琥珀酸亚胺的二甲基亚砜溶液，其摩尔浓度为0.5~1.5μmol/L；

所述链霉亲和素溶液为链霉亲和素溶液的磷酸缓冲盐溶液，其质量浓度为8~12μg/mL；

所述生物素化的抗体溶液为生物素化的抗体的磷酸缓冲盐溶液，其质量浓度为8~12μg/mL。

7.根据权利要求1或6所述的一种捕获和/或计数细胞的微流控芯片，其特征在于，生物素化的抗体为生物素化的EpCAM抗体。

8.一种如权利要求1-7任一所述的微流控芯片在用于捕获和/或基于上转换荧光在计数细胞中的应用。