[发明专利]一种硫酸软骨素裂解酶及其编码基因与应用

权利要求书

1.一种硫酸软骨素裂解酶enCSase，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.如权利要求1所述的硫酸软骨素裂解酶enCSase，其特征在于，所述硫酸软骨素裂解酶enCSase为内切酶，分离自发光杆菌（Photobacterium sp.）QA16，发光杆菌QA16于2020年8月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号CGMCC NO.20556。

3.权利要求1所述的硫酸软骨素裂解酶enCSase的编码基因，其特征在于，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.如权利要求3所述的编码基因，其特征在于，所述硫酸软骨素裂解酶enCSase的编码基因来源于发光杆菌（Photobacterium sp.）QA16，发光杆菌QA16于2020年8月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号CGMCC NO.20556。

5.一种重组表达载体，其特征在于，在表达载体中插入了权利要求3所述的硫酸软骨素裂解酶enCSase的编码基因。

6.如权利要求5所述的重组表达载体，其特征在于，所述表达载体为大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、枯草杆菌表达载体、乳酸菌表达载体、链霉菌表达载体、噬菌体载体、丝状真菌表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体或哺乳动物细胞表达载体。

7.一种重组细胞，其特征在于，在宿主细胞中插入了权利要求3所述的硫酸软骨素裂解酶enCSase的编码基因。

8.如权利要求7所述的重组细胞，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌宿主细胞、酵母菌宿主细胞、枯草杆菌宿主细胞、乳酸菌宿主细胞、放线菌宿主细胞、丝状真菌宿主细胞、昆虫细胞或哺乳动物细胞。

9.如权利要求8所述的重组细胞，其特征在于，所述的大肠杆菌宿主细胞为Escherichia coli BL2 1、Escherichia coli JM 109或Escherichia coli DH 5α；所述酵母菌宿主细胞为Saccharomyces cerevisiae、Pichia pastoris或Kluyveromyces lactis；所述枯草杆菌宿主细胞为Bacillus subtilis R25或Bacillus subtilis 9920；所述乳酸菌宿主细胞为Lactic acid bacteria C0CC101；所述放线菌宿主细胞为Streptomycesspp.；所述丝状真菌宿主细胞为Trichoderma viride，Trichoderma reesei，Aspergillus niger或Aspergillus nidulans；所述昆虫细胞为Bombyxmori或Antharaea eucalypti；所述哺乳动物细胞为中国仓鼠卵巢细胞CHO，幼小仓鼠肾脏细胞BHK或中国仓鼠肺细胞CHL。

10.权利要求7所述的重组细胞在重组表达硫酸软骨素裂解酶enCSase中的应用。

11.权利要求1所述的硫酸软骨素裂解酶enCSase在制备硫酸软骨素寡糖，硫酸皮肤素寡糖和/或透明质酸寡糖中的应用。