[发明专利]一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法

说明书

本发明属于微生物培育技术领域，具体的说是一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法，包括底座、箱体和电动机；所述箱体为圆盘型设计；所述底座固连箱体底部；所述箱体内部开设有培养腔；所述电动机固连于箱体一侧；所述电动机输出轴贯穿箱体，并延伸至培养腔内；所述电动机输出轴位于培养腔内一端固连有转动轮；所述培养腔靠近电动机一侧开设有环形槽；本发明通过流加箱中气压的增大，使液态培养基在压力和重力的作用下通过微孔向培养腔中滴落，并在培养腔中滴落的过程中掉落在承接板上的培养皿中，液滴携带溶解氧和营养物质滴落在培养皿中，为培养皿中的马克思克鲁维酵母菌菌株提供养分以及氧气。

技术领域

本发明属于微生物培育技术领域，具体的说是一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法。

背景技术

现有技术中通过控制碳源的分批次添加进而有效的在马克思克鲁维酵母菌菌株的培养过程中实现加速繁育速度，增强菌株活性的效果，但是现有技术中流加法多数为直接向培养皿中添加碳源，然后利用搅拌使碳源在培养皿中均匀分布，在高密度培养过程中通过搅拌的方式并不能很好的使添加的碳源与原有的培养基之间良好到的混合，且搅拌作用还容易影响菌株的正常繁殖，造成菌株生长繁殖速率降低，同时马克思克鲁维酵母菌菌株为好氧菌，在低氧环境下其生长、繁育速率均处于低速状态，高密度培养过程中随着菌株数量的增多培养基中溶解氧持续消耗，当溶解氧含量较低时，对马克思克鲁维酵母菌菌株的培养繁殖存在一定的抑制作用。

中国专利发布的细胞培养装置以及细胞培养方法，申请号：CN2017800520915，细胞培养装置具有：培养槽，其为水平截面积随着趋向上方而增加的形状，用于在培养液中进行细胞的培养；作为供给部的泵以及培养液供给管，它们对培养槽供给所述培养液；控制部，其控制由供给部进行的培养液的供给，通过控制部的控制，从供给部对培养槽断续地供给培养液，在培养液中形成环绕上升流，从而在培养槽内在所述细胞滞留的培养区域形成培养液的塞流，该方案中通过泵给培养液，进而利用培养液的环绕上流使培养液与细胞之间均匀分布，但是由于通过底部泵给的方式无法使培养液与空气接触，进而导致培养液中无法有效地溶解氧气，不适用于好氧菌的培养。

鉴于此，本发明研制一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法，用于解决上述技术问题。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，解决现有技术中采用流加法高密度培养马克思克鲁维酵母菌菌株时，需要人工进行添加培养基，不仅较为浪费人力，同时人工流加培养基与原有的培养基之间分布不均的问题，本发明提出的一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：本发明所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法，该方法包括以下步骤：

S1：将制备完成的马克思克鲁维酵母菌菌株培养基在95℃高温下进行高温灭菌5-6min,灭菌完成后将培养基填充于培养箱中，并在使培养箱内部处于95-98℃下保持20-30min充分完成灭菌工艺；

S2：将灭菌完成后的培养箱冷却至28℃后，将马克思克鲁维酵母菌菌株均匀接种于培养基上，并在28℃下进行发酵培养16H，在培养过程中每间隔4h向培养基表面喷洒液态培养基；

S3：将培养时间达到16H的培养箱中的残余培养基以及菌落用于接种生产发酵剂，并于发酵完成后降温至0-4℃，即可得到含有大量马克思克鲁维酵母菌菌株的液态发酵剂；

所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基由以下原料构成：

马铃薯淀粉1％、脱脂牛奶30％、葡萄糖2％、番茄浓缩汁0.5％、柠檬酸钠0.05％、纯净水66.45％，柠檬酸水0.4％；