[发明专利]一种体外构建的精准预测癌症患者用药的方法

说明书

本发明公开了一种体外构建的精准预测癌症患者用药的方法，该方法包括如下步骤：1)肠癌类器官的构建，使用结肠癌、直肠癌或结直肠癌患者通过手术或活检得到的癌组织培养成更纯净的肠癌类器官；2)大通量药物筛选试验，以微器官为单位进行高通量药物敏感性检测。本发明的体外构建的精准预测癌症患者用药的方法具有：研磨组织使消化时间缩短，且消化程度一致；温和的消化液减少此步骤对细胞的伤害；不同的孔径过滤，更精确筛选所需细胞；去除免疫细胞，获得更纯净的癌细胞；自制培养基，更符合肠癌类器官生长所需成分，提高培养成功率；以类器官为单位进行药筛，更好的模拟临床用药后体内癌组织的反应。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种体外构建的精准预测癌症患者用药的方法。

背景技术

目前，预测癌症患者用药的方法主要有以下几种：

1)基因诊断

临床上出现基因诊断后所用靶向药无效的情况较多，可能由于体内环境复杂，基因突变不是主要致病因素或其他未知原因，所以基因诊断对患者用药的预测性不高。

2)癌症细胞系用药实验

细胞系体外生长环境与体内环境有显著不同，且多为商业化的通用细胞系，个性化程度低，无法准确模拟实际肿瘤对药物的反应，也无法做到个性化，预测性不高。

3)临床人体用药疗效统计分析

临床用药时间周期通常以年为单位，短时间内无法得知所用药物是否对患者有效。

4)类器官技术

目前类器官培养技术仍在不断探索中，培养出生长状态良好且功能接近原病灶的癌症类器官仍是该领域研究者努力的方向。

发明内容

针对现有技术中存在的上述不足，本发明提供了一种体外构建的精准预测癌症患者用药的方法，该方法完善肠癌类器官的培养方法，更精确的模拟癌症器官体内生长状态，使其对药物的敏感性更接近体内癌症细胞对药物的敏感性，更高效和直观的反映有效药物，同时该方法根据患者个体差异获得个性化的有效药物。

为了解决上述技术问题，本发明采用了如下技术方案：

一种体外构建的精准预测癌症患者用药的方法，该方法包括如下步骤：

1)肠癌类器官的构建

使用结肠癌、直肠癌或结直肠癌患者通过手术或活检得到的癌组织培养成更纯净的肠癌类器官；该步骤包括了如下步骤：

a)对癌组织需要进行研磨操作；

b)对癌组织的消化使用PBS和Tryple处理28-32min；

c)对消化液进行不同孔径的过滤；

d)对消化液进行去除免疫细胞及红细胞的操作；

e)使用自制培养基进行培养；

2)大通量药物筛选试验；

以微器官为单位进行高通量药物敏感性检测。

药筛结果可个性化指导提供该癌症组织的患者用药。

作为本发明的一种优选方案，步骤1)中的肠癌类器官的构建具体包括如下步骤：

1.1)清洗：将组织取出放入普通培养皿中用PBS清洗3-4次，至无血性混浊，液体基本无色；

1.2)研磨：洗净后将组织转移至干净的低吸附皿中使用无菌刀片剁碎，使其均匀松散且不粘连；

1.3)消化：取4ml组织消化液(PBS+Tryple)消化剁碎的组织，吹打混匀，并在37℃恒温水浴锅中，消化30min；