[发明专利]一种呼吸道病原微生物检测用引物及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种呼吸道病原微生物检测用引物以及利用该引物的检测方法，所述检测方法包括：提取获得目标微生物DNA/RNA，使用如本发明所述引物对所述目标微生物DNA/RNA进行RPA扩增，得到扩增产物；检测所述扩增产物。本发明提供的呼吸道病原微生物检测用引物以及利用该引物的检测方法，能够实现一个样本的多指标一次性检测目的，极大地缩短了检测时间和样本暴露时间，能够在较短时间内定性检测出呼吸道病原微生物的存在。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种呼吸道病原微生物检测用引物及其应用。

背景技术

由呼吸道病原微生物导致的呼吸系统疾病是常见病、多发病，成为目前威胁全球人类健康的主要疾病。呼吸系统疾病的轻症患者多表现为咳嗽、胸痛、呼吸受影响，而重症患者则表现为呼吸困难、缺氧甚至呼吸系统衰竭而致死。呼吸系统疾病在城市的死亡率占第三位，在农村的死亡率则居首位。常见的呼吸道病原微生物有甲型流感病毒(甲流)、乙型流感病毒(乙流)、新型冠状病毒(新冠)等。2019新型冠状病毒肺炎由2019新型冠状病毒(2019-novel Coronavirus，2019-nCoV)所导致，于2020年1月12日得到世界卫生组织命名。

冠状病毒家族成员众多，而新型冠状病毒是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株。在感染冠状病毒后常见的体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中，感染者可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。

目前，对于新型冠状病毒所致疾病没有特异性治疗方法，且新冠病毒肺炎患者的临床表现通常与流感患者类似，在临床中极易误诊，而错误诊断后可能会影响病症的治疗时间。在临床或实验室中，用于呼吸道病原微生物检测的方法主要包括：病毒分离培养、抗体中和检测、免疫组化检测、间接免疫荧光检测、酶联免疫吸附试验、基因芯片、核苷酸序列测定及荧光定量PCR技术等。市场上检测2019-nCoV的方法繁多，均存在实验步骤繁琐、反应时间过长、检测费昂贵等缺陷。

因此，亟需一种呼吸道病原微生物的检测方法，以克服实验步骤繁琐、反应时间过长、检测费昂贵等缺陷。

发明内容

鉴于上述问题，本发明提供呼吸道病原微生物检测用引物以及利用该引物的检测方法，以克服实验步骤繁琐、反应时间过长、检测费昂贵等缺陷。本发明提供的呼吸道病原微生物检测用引物以及利用该引物的检测方法能够实现一个样本的多指标一次性检测目的，极大地缩短了检测时间和样本暴露时间，能够在较短时间定性检测出呼吸道病原微生物的存在。

本发明用于实现上述目的的技术方案如下：

在本发明的一个方面，提供了一套呼吸道病原微生物检测用引物，其由以下序列所示的引物组成：

IAV-F：GACAAGACCRATYCTGTCACCTYTGACTAAGGG

IAV-R：ATTGAGGGCATTYTGGACAAAKCGTCTACGCTGC

IBV-F：GACTACCCTGGTCAAGACCGCCTAAACAGACTAA

IBV-R：TGTCATCAAGGCACCTTCCTGGTGTTAGAGGGTAA

2019-nCoV-1F：GGTAATGCAACAGAAGTGCCTGCCAATTCAACTCT

2019-nCoV-1R：AACGATTGTGCATCAGCTGACTGAAGCATGGGTTC

2019-nCoV-2F：GTCGGCCCCAAGGTTTACCCAATAATACTGCGTC

2019-nCoV-2R：TGAGGAAGTTGTAGCACGATTGCAGCATTGTTAGC。