[发明专利]分子标记物APOL3在诊断结核病中的应用

说明书

本发明属于生物医药领域，涉及一种分子标记物APOL3在诊断结核病中的应用。本发明的标记物能够作为诊断结核病或者检测结核分枝杆菌的标识，并且其具有良好的敏感性和特异性。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种分子标记物APOL3在诊断结核病中的应用。

背景技术

结核病(Tuberculosis，TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb) 感染引发的一种严重威胁人类健康的慢性传染性疾病，全球将近四分之一的人感染结核分枝杆菌，并长期处于潜伏感染状态，其中5％～10％可能会在一生中发生活动性结核病。由于结核分枝杆菌的自身的细胞壁较厚、脂肪酸含量较高、细胞内寄生等生物学特点，结核病早期以及快速诊断的灵敏度和检出率均较低，一直未有突破进展。目前活动性结核病的诊断主要依据病原学检测和患者影像学诊断。针对结核分枝杆菌组分的病原学检测被认为是结核诊断的“金标准”，针对病原学的早期的快速诊断的灵敏度和检出率较低。患者的影像学诊断存在假阳性高、无法区分肺结核与其他肺部感染的缺陷。而针对宿主的免疫检测方法，如结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test，TST)和γ干扰素释放试验(interferon gamma release assays，IGRA)只能判定结核菌感染而无法确定是否为活动性结核，且无法区分结核与非结核分枝杆菌感染。因此，迫切需要新的诊断方法，实现结核病患者的早期和快速诊断，从而达到有效治疗个体，控制、消灭结核传播的目标。

结核病诊断：主要有以下几种方法：

(一)痰菌检查：以患者痰样本中检出结核菌做为确诊依据，是诊断肺结核的“金指标”。主要方法有：1痰涂片检查：利用痰涂片检查结核菌的存在情况，简便易行，但结核菌检出率较低；2结核菌培养：诊断痰标本进行细菌培养。结果可信度高，并能做结核菌药敏试验，但需时6-8周，应用受到限制。3.BACTEC 法测结核分枝杆菌的代谢物，一般两周可出结果，但菌量多少影响阳性结果出现的天数。4.分子诊断：利用特异引物或探针检测痰中的结核菌，灵敏度较高，但无法检测菌阴结核。

(二)Ⅹ射线检查：胸部Ⅹ线检查可以早期发现结核病，而且可以确定病灶的部位、性质、范围，了解发病情况及用于治疗效果的判断，并且开展方便，病人乐于接受。胸部CT可以发现较小的或隐蔽部位的病变，可以弥补一般Ⅹ线检查的不足。但容易与其他肺部疾病混淆，需要专业医生确证。

(三)肺结核病免疫学诊断：1.常用的有结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)试验，该试验阳性是感染过结核菌的证据之一。假阳性率高，容易误诊。2.血中、痰中结核抗体检测阳性也有助于诊断，如38kDa及其许多包含38kDa抗原在内的融合蛋白抗原，用于体液免疫方面的诊断，但也不可避免的出现假阳性率。

(四)其他检查，只能作为辅助诊断，不能作为诊断依据。1.纤维支气管镜检查：可以直接观察或间接判断支气管、肺内病变，并且有活组织检查、灌洗、录像、拍摄气管内照片等功能，对于诊断和鉴别诊断特别有用。2.胸腔镜和纵隔镜检查：均可用于观察胸腔、纵隔内肿大淋巴结，并可取出活组织检查以利诊断和鉴别诊断。3.超声波检查：主要用于胸腔积液的诊断和鉴别诊断。

在常用的肺结核诊断技术中存在着阳性率低、周期长、操作复杂、假阳性率高等问题，因此迫切需要一种快速、简便、敏感、特异的诊断方法，以快速、准确地诊断结核病。

APOL3(Apolipoprotein L3)基因是载脂蛋白L基因家族的一员，与22号染色体上的其他家族成员呈簇状存在，其编码蛋白存在于细胞质中，可能影响脂质(包括胆固醇)的运动和/或使脂质与细胞器结合。APOL3在脾、肺、淋巴结等器官和组织中高表达，参与炎症反应、脂蛋白代谢、I-kappaB激酶/NF-kappaB信号传导调控。此外，TNF-ɑ可诱导APOL3在正常和动脉粥样硬化的髂动脉和主动脉内皮细胞中的表达上调。目前未见与结核病相关报道，以及相关专利申请。

发明内容