[发明专利]一种新型的吸入性过敏原融合蛋白及其构建方法、应用在审
| 申请号: | 202011061711.1 | 申请日: | 2020-09-30 |
| 公开(公告)号: | CN112225816A | 公开(公告)日: | 2021-01-15 |
| 发明(设计)人: | 秦枫;何志威;吴荣桂;张小飞;颜松;周玥;黄敬双;万文琴;吴斌;任伟超;刘萍 | 申请(专利权)人: | 四川携光生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;G01N33/68 |
| 代理公司: | 成都行之专利代理事务所(普通合伙) 51220 | 代理人: | 史丽红 |
| 地址: | 610000 四川省成都市高新*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 新型 吸入 过敏原 融合 蛋白 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种新型的吸入性过敏原融合蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.一种编码如权利要求1所述的一种新型的吸入性过敏原融合蛋白的基因,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.一种含有如权利要求2所述基因的重组质粒。
4.一种含有如权利要求1所述吸入性过敏原融合蛋白的试剂盒。
5.如权利要求1所述的一种新型的吸入性过敏原融合蛋白的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、依次连接过敏原Der P21、Der f13、Abm a 8(t)蛋白核苷酸序列获得目的基因,其中,每相邻两种过敏原蛋白核苷酸序列之间加入Linker序列;
S2、在目的基因N端加入真核KOZAK序列,在上游加入限制性核酸内切酶位点Not I,在下游加入酶切位点BamH I,C端加入6*His标签序列,获得全序列基因;
S3、将步骤S2获得的全序列基因与质粒进行双酶切获得酶切产物;
S4、将步骤S3获得的酶切产物通过T4连接酶连接,得到重组质粒;
S5、将重组质粒在哺乳细胞中表达获得吸入性过敏原融合蛋白。
6.根据权利要求5所述的吸入性过敏原融合蛋白的构建方法,其特征在于,还包括对吸入性过敏原融合蛋白的纯化。
7.采用权利要求6所述的吸入性过敏原融合蛋白的构建方法所制备的融合蛋白。
8.如权利要求1所述的吸入性过敏原融合蛋白或如权利要求4所述试剂盒在制备免疫学诊断试剂中的应用。
9.如权利要求1所述的吸入性过敏原融合蛋白或如权利要求4所述试剂盒在制备吸入性过敏原诊断试剂中的应用。
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