[发明专利]D-二聚体测定试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了一种D‑二聚体测定试剂盒及其应用，涉及检测技术领域，本发明提供的D‑二聚体测定试剂盒，其中鼠抗人D‑二聚体单克隆抗体胶乳颗粒由鼠抗人D‑二聚体单克隆抗体结合至6‑氨基己酸修饰的聚苯乙烯胶乳颗粒制备得到，通过在聚苯乙烯胶乳颗粒表面修饰6‑氨基己酸，能够有效延长聚苯乙烯胶乳颗粒表面的羧基链长。同时，本发明通过限定溶解6‑氨基己酸的PBST溶液的pH为8.0‑9.0，能够进一步提高鼠抗人D‑二聚体单克隆抗体与6‑氨基己酸修饰的聚苯乙烯胶乳颗粒的结合效率。此外，该试剂盒还具有操作方法简单，快速、准确、灵敏度高、特异性强、稳定性好可常温保存等优点。

技术领域

本发明涉及检测技术领域，尤其是涉及一种D-二聚体测定试剂盒及其应用。

背景技术

纤维蛋白溶解系统是人体中最重要的抗凝系统，它对保持人体血管壁的通透性以及物质交换有着重要的作用。迄今为止，针对纤维蛋白溶解系统功能性检测，主要采用免疫比浊法定量检测纤溶酶降解纤维蛋白原和交联纤维蛋白形成的各种可溶性片段，统称为纤维蛋白原降解产物(FDP)，其中D-二聚体则是降解产物中最小片段，是交联纤维蛋白的特异性降解产物。

近几年来，已经建立了多种有价值的D-二聚体检测方法，主要包括乳胶凝集法、酶联免疫吸附法、荧光抗体检测法、免疫金标法以及胶乳免疫比浊法。其中胶乳免疫比浊法由于其操作简单、快速，更适用于急诊检测，用于定性或半定量检测。

然而，迄今为止，胶乳微球-抗体复合物的制备，均采用偶联试剂进行偶联，且抗体与刚性微球进行结合时，更趋向热力学因素影响，导致抗体在表面结合时影响活性位点的暴露。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种D-二聚体测定试剂盒，以至少缓解了现有技术中存在的技术问题之一。

本发明的第二个目的在于提供上述一种D-二聚体测定试剂盒在血凝分析仪和生化分析仪的检测中的应用。

本发明提供了一种D-二聚体测定试剂盒，所述D-二聚体测定试剂盒包括D-二聚体R1试剂和D-二聚体R2试剂；

所述D-二聚体R1试剂包括缓冲溶液、促凝剂和防腐剂；

所述D-二聚体R2试剂包括鼠抗人D-二聚体单克隆抗体胶乳颗粒、缓冲溶液、稳定剂和防腐剂；

所述鼠抗人D-二聚体单克隆抗体胶乳颗粒由鼠抗人D-二聚体单克隆抗体结合至6-氨基己酸修饰的聚苯乙烯胶乳颗粒制备得到；

所述6-氨基己酸修饰的聚苯乙烯胶乳颗粒通过如下方法制备：

将预处理后的聚苯乙烯胶乳颗粒经6-氨基己酸的PBST溶液溶解，反应后固液分离，得到所述经6-氨基己酸修饰的聚苯乙烯胶乳颗粒；

其中，所述PBST的pH为8.0-9.0。

进一步的，所述预处理包括向MES溶液中加入聚苯乙烯胶乳颗粒水溶液，然后再依次加入EDC溶液和NHS溶液，混合反应后，固液分离得到预处理后的聚苯乙烯胶乳颗粒；

优选地，用0.1M的MES溶液配制浓度为100mg/ml的EDC溶液；

优选地，用0.1M的MES溶液配制浓度为100mg/ml的NHS溶液；

优选地，所述MES溶液的pH为6.0；

优选地，所述聚苯乙烯胶乳颗粒水溶液的浓度为10mg/ml。