[发明专利]一种3D生物组织专用培养装置和块状培育肉的制备方法

权利要求书

1.一种块状培育肉的制备方法，其特征在于，包括：

先将动物骨骼肌卫星细胞与生物墨水混合进行3D生物打印，然后将打印所得3D动物骨骼肌卫星细胞组织置于3D生物组织专用培养装置中进行增殖培养和分化；所述生物墨水为甲基丙烯酸酐化明胶和/或纳米纤维素；

所述3D生物组织专用培养装置包括：

3D生物组织培养槽，用于放置3D生物组织，和

储液槽，用于盛装培养基；

所述3D生物组织培养槽和所述储液槽之间通过管路连接形成循环回路，供培养基循环流动；

所述3D生物组织培养槽的敞口处设有密封塞，所述密封塞的内侧设有多个培养基灌注针，使用时所述培养基灌注针穿过3D生物组织。

2.根据权利要求1所述的块状培育肉的制备方法，其特征在于，所述动物骨骼肌卫星细胞为猪骨骼肌卫星细胞时，将打印所得3D动物骨骼肌卫星细胞组织置于3D生物组织专用培养装置中后，再将整体置于36.5~37.5℃、5%CO₂条件下培养，1-2天后待细胞形态稳定，将增殖培养基更换为分化培养基，3~5天后，将分化培养基更换为增殖培养基，继续培养直至细胞分化融合形成块状培育肉。

3.根据权利要求2所述的块状培育肉的制备方法，其特征在于，所述动物骨骼肌卫星细胞为猪骨骼肌卫星细胞时，采用的增殖培养基包含表皮生长因子8~12ng/mL、成纤维细胞生长因子0.5~2ng/mL、胰岛素0.005~0.015mg/L和地塞米松0.3~0.5µg/mL，采用的分化培养基包含胰岛素0.005~0.015mg/L。

4.根据权利要求1所述的块状培育肉的制备方法，其特征在于，所述动物骨骼肌卫星细胞为鸡骨骼肌卫星细胞时，将打印所得3D动物骨骼肌卫星细胞组织置于3D生物组织专用培养装置中后，再将整体置于40.5~41.5℃、5%CO₂条件下培养，1-2天后待细胞形态稳定，将增殖培养基更换为分化培养基，3~5天后，将分化培养基更换为增殖培养基，继续培养直至细胞分化融合形成块状培育肉。

5.根据权利要求4所述的块状培育肉的制备方法，其特征在于，所述动物骨骼肌卫星细胞为鸡骨骼肌卫星细胞时，采用的增殖培养基为含10~20%鸡血清或胎牛血清的Mccoy's 5A培养基，采用的分化培养基为含0~5%鸡血清或胎牛血清的Mccoy's 5A培养基。

6.根据权利要求1所述的块状培育肉的制备方法，其特征在于，所述动物骨骼肌卫星细胞为经提取和体外培养所得，其中，猪骨骼肌卫星细胞为从新生期动物的骨骼肌组织中提取，鸡骨骼肌卫星细胞为从孵化器的胚胎中提取。

7.根据权利要求6所述的块状培育肉的制备方法，其特征在于，所述体外培养采用贴壁培养方式或负载于微载体微球表面以悬浮培养的方式培养。

8.一种块状培育肉，其特征在于，由权利要求1-7任一项所述的块状培育肉的制备方法制得。