[发明专利]一种免疫比浊试剂盒

说明书

本发明涉及体外诊断医学检验领域，更具体地，本发明涉及一种免疫比浊试剂盒。所述试剂盒包含试剂1和试剂2，所述试剂1中包含0.2‑6.0g/L的聚氧乙烯烷基醚，所述试剂2中包含2.0‑10.0g/L的聚氧乙烯基衍生物和10‑50vol％的抗体。本发明的免疫比浊试剂盒在测定临床参考值附近的测定值重复性好，而且在低值区也具有较高的灵敏度，变异系数小于2％，且具有良好的稳定性和安全性，便于在实际测试中进行推广应用。

技术领域

本发明涉及体外诊断医学检验领域，更具体地，本发明涉及一种免疫比浊试剂盒。

背景技术

免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是：当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时，形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下，自液相析出，形成微粒，使反应液出现浊度。当抗体浓度固定时，形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加，反应液的浊度也随之增加。通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照，即可计算出检样中抗原的含量。

以载脂蛋白E(ApoE)为例，目前临床常用的测定ApoE的方法主要是免疫透射比浊法(ITA)。血清中的ApoE与试剂中的抗人ApoE抗体发生特异性结合，形成不溶性的具有一定浊度的免疫复合物，在全自动生化免疫分析仪上测定主波长340nm和副波长700nm处的吸光度，浊度的高低反应了血清样本中ApoE的含量。

免疫比浊法因其样本用量少，可在生化分析仪器上批量测定，耗时短等特点受到欢迎，但是目前许多厂家建立的试剂和方法都存在一些不足，主要体现在：临床参考值附近的测定值重复性差，低值区灵敏度低。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明对免疫比浊试剂盒的优化方式进行了探究，偶然发现，当选择聚氧乙烯烷基醚作为试剂1中的表面活性剂，选择聚氧乙烯基衍生物作为试剂2中的表面活性剂(通常免疫比浊试剂的试剂2中不添加表面活性剂)，并将二者浓度分别控制在0.2-6.0g/L和2.0-10.0g/L时，试剂盒测定血清样本的重复性和灵敏度均得到显著提高。

基于上述发现，本发明提供一种免疫比浊试剂盒，所述试剂盒包含试剂1和试剂2，所述试剂1中包含0.2-6.0g/L的聚氧乙烯烷基醚，所述试剂2中包含2.0-10.0g/L的聚氧乙烯基衍生物和10-50vol％的抗体。

作为优选，在试剂1中，所述聚氧乙烯烷基醚的浓度为0.5-2.5g/L，更优选为1.0g/L。

作为优选，在试剂2中，所述聚氧乙烯基衍生物的浓度为2.0-5.0g/L，更优选为3.0g/L。

本发明中的“聚氧乙烯烷基醚”的分子通式为RO-(CH₂CH₂O)-H。

在一个优选的实施方式中，所述的“聚氧乙烯烷基醚”为EMULGEN 709，本发明中的“聚氧乙烯基衍生物”为EMULGEN B66，其在本发明中可以获得更好的重复性和灵敏度。

在免疫比浊试剂盒中，试剂1一般用于使待测样品的抗原位点充分暴露，试剂2一般用于与待测样品形成抗原-抗体复合物。通常情况下，所述试剂1中还包含缓冲液、无机盐、螯合剂、防腐剂和聚集物，试剂2中还包含缓冲液、无机盐和防腐剂。在本发明的试剂1和试剂2中使用本领域人员常规选用的试剂，均可获得不错的重复性和灵敏度。

作为优选，所述试剂1中还包含10.0-60.0g/L的聚乙二醇，当所述聚乙二醇的数均分子量为6000-20000，更优选为10000-20000时，既不会引起杂反应，同时可以起到促聚集的作用。

作为优选，所述试剂1中还包含0.1-3.0g/L TWEEN-20，所述TWEEN-20与聚氧乙烯烷基醚的重量比为1：1.5-2.5，更优选为1:2。在上述二者的复配效果下，可以协同提升试剂1的稳定性。