[发明专利]一种靶向Frizzled7人源化抗体及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种靶向Frizzled7人源化抗体及其制备方法与应用。所述靶向Frizzled7人源化抗体具有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区氨基酸序列如SEQ ID No.11所示，所述轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID No.12所示。本发明的靶向Frizzled7人源化抗体SHH002‑hu1保留了鼠源单抗SHH002与重组人Fzd7蛋白的高亲和力(KD值均小于1×10^‑12M)，与Fzd7特异性结合，且与Fzd家族其他受体没有交叉反应，降低了抗体在可能的临床应用中的脱靶风险。SHH002‑hu1可以与肿瘤细胞表面Fzd7结合，阻断Wnt信号通路；并可以与病人肿瘤组织中的Fzd7有效结合，具有潜在的肿瘤靶向性，是未来抗肿瘤治疗新的候选药物。

本申请是分案申请，本分案申请的母案申请日为2019年11月6日，申请号为201911078254.4，发明名称为“一种靶向Frizzled7人源化抗体及其制备方法与应用”。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种靶向Frizzled7人源化抗体及其制备方法 与应用。

背景技术

Wnt信号通路是一类在物种进化过程中高度保守的信号通路，其在动物胚胎的早期 发育、器官形成和肿瘤的发生发展中，发挥至关重要的作用。Wnt蛋白家族与受体Frizzled (Fzd)的N端胞外结构区CRD(cysteine-rich domain)结合，与Dvl(disheveled)蛋白 相互作用并激活下游信号通路。Fzd蛋白是一类具有七次跨膜分子结构的Wnt受体家族， 该家族中有10个成员蛋白，Frizzled-7(Fzd7)为成员之一。研究表明Wnt受体Fzd7异常表达于不同种类的癌症中(包括三阴性乳腺癌(TNBC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、 肝癌(HCC)等)(Polakis P,2012,EMBO J,31:2737-46；King TD et al,2012,J Cell Biochem,113:13-8)；Fzd7通过激活经典Wnt通路(Wnt/β-catenin)来诱导肿瘤的发生和转移。

Wnt通路参与肿瘤的侵袭和转移，且对肿瘤血管生成也有调节作用，对Fzd7进行基因敲除可以显著抑制肿瘤细胞增殖、移植瘤生长及血管新生。Wnt信号和肿瘤干细胞行为也存在密切联系，Fzd7就是肿瘤干细胞标记物之一，且这些肿瘤干细胞中Fzd7的上调与 肿瘤化疗耐受以及病人的低生存率显著相关(Barker N et al.,2009,Nature,457:608-11)。另外Fzd7的“context-specific functions”暗示了选择性靶向Fzd7可以在不影响正常组织稳 态的前提下治疗癌症。综上，Fzd7是多种肿瘤的潜在治疗靶点(Kahn M,2014,Nat RevDrug Discov,13:513-32)。