[发明专利]表达靶向PD-1/PD-L1的效应RNA分子的多能干细胞及其衍生物

权利要求书

1.一种多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干细胞或其衍生物的基因组导入有PD-1和/或PD-L1阻断物的表达序列；所述PD-1阻断物为靶向PD-1的shRNA和/或shRNA-miR中的至少一种；所述PD-L1阻断物为靶向PD-L1的shRNA和/或shRNA-miR中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：

(1)靶向PD-1的shRNA和/或shRNA-miR的靶序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.10所示；

(2)靶向PD-L1的shRNA和/或shRNA-miR的靶序列如SEQ ID NO.11～SEQ ID NO.20所示。

3.根据权利要求1所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干细胞或其衍生物基因组的B2M基因和/或CIITA基因被敲除。

4.根据权利要求1所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干细胞或其衍生物的基因组中还导入至少一种免疫兼容分子的表达序列，所述免疫兼容分子用于调控多能干细胞细胞或其衍生物中与免疫应答相关的基因的表达。

5.根据权利要求4所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述与免疫应答相关的基因包括：

(1)主要组织相容性复合体基因，包括HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRA、HLA-DRB1、HLA-DRB3、HLA-DRB4、HLA-DRB5、HLA-DQA1、HLA-DQB1、HLA-DPA1和HLA-DPB1中的至少一种；

(2)主要组织相容性复合体相关基因，包括B2M和CIITA中的至少一种。

6.根据权利要求4所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述所述免疫兼容分子包括以下的至少一种：

(1)免疫耐受相关基因，包括CD47和HLA-G中的至少一种；

(2)HLA-C类分子，包括人群中比例合计超过90％的HLA-C复等位基因，或者超过90％的HLA-C复等位基因与B2M构成的融合蛋白基因；

(3)靶向主要组织相容性复合体基因的shRNA和/或shRNA-miR，所述主要组织相容性复合体基因包括HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRA、HLA-DRB1、HLA-DRB3、HLA-DRB4、HLA-DRB5、HLA-DQA1、HLA-DQB1、HLA-DPA1和HLA-DPB1中的至少一种；

(4)靶向主要组织相容性复合体相关基因的shRNA和/或shRNA-miR，所述主要组织相容性复合体相关基因包括B2M和CIITA中的至少一种。

7.根据权利要求6所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：

所述靶向主要组织相容性复合体基因的shRNA和/或shRNA-miR的靶序列为SEQ IDNO.34～SEQ ID NO.121中的至少一种；

所述靶向主要组织相容性复合体相关基因的shRNA和/或shRNA-miR的靶序列为SEQ IDNO.21～SEQ ID NO.33中的至少一种。

8.根据权利要求1-7任一项所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干细胞或其衍生物的基因组中还导入shRNA和/或miRNA加工复合体相关基因和/或抗干扰素效应分子，其中：shRNA和/或miRNA加工复合体相关基因包括Dhrosha、Ago1、Ago2、Dicer1、Exportin-5、TRBP(TARBP2)、PACT(PRKRA)、DGCR8中的至少一种；所述抗干扰素效应分子为靶向PKR、2-5As、IRF-3和IRF-7中的至少一种的shRNA和/或shRNA-miR。

9.根据权利要求8所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述靶向PKR、2-5As、IRF-3或IRF-7的shRNA和/或shRNA-miR的靶序列为SEQ ID NO.122～SEQ ID NO.181中的至少一种。