[发明专利]一种底栖硅藻的半固体悬浮培养方法

说明书

本发明提出一种底栖硅藻的半固体悬浮培养方法，涉及藻类培养技术领域。该培养方法，包括如下步骤：(1)配制基质水溶液，其中，所述基质包括海藻酸钠和羧甲基纤维素钠；(2)配制营养盐混合物；(3)将上述营养盐混合物溶解于上述基质水溶液，得中间混合溶液；(4)将底栖硅藻接种到上述中间混合溶液中，得含有底栖硅藻的混合溶液；(5)将钙化剂溶解于上述含有底栖硅藻的混合溶液中，得底栖硅藻半固体培养液；(6)培养上述底栖硅藻半固体培养液。

技术领域

本发明属于藻类培养技术领域，尤其涉及一种底栖硅藻的半固体悬浮培养方法。

背景技术

底栖硅藻是一类重要的微藻类群，作为最主要的初级生产者，是匍匐型贝类如鲍、蝾螺，埋栖型贝类如缢蛏、泥蚶，以及底栖动物如海参、海胆等名贵水产动物苗种的重要饵料。

底栖硅藻营底栖生活，底栖硅藻的生长受到了营养物质和附着面积的双重限制。目前，普遍采用的底栖硅藻的培养方法为先通过海区刮洗池底，擦洗大型海藻表面后过滤等方法获得底栖硅藻藻种，再采用固定化细胞培养方法进行育苗养殖。

然而，此种培养方式存在诸多问题。例如，藻种不纯，施肥后蓝藻等杂藻会与底栖硅藻争夺生长资源，导致底栖硅藻生长缓慢、密度低，甚至培养失败。又如，固定化培养时，固定化材料不利于藻种生长，如常用的固定化材料包括玻片，海绵等，玻璃的密度高，易堆叠，无法充分利用水体；海绵透光性差，且细胞洗脱困难。因此，上述问题导致底栖硅藻大规模培养十分困难，限制了底栖硅藻单种培养技术在育苗生产中推广应用。

发明内容

本发明提供一种底栖硅藻的半固体悬浮培养方法，以解决底栖硅藻无法大规模培养的技术问题。

本发明提出一种底栖硅藻的半固体悬浮培养方法，包括如下步骤：

(1)配制基质水溶液，其中，所述基质包括海藻酸钠和羧甲基纤维素钠；

(2)配制营养盐混合物；

(3)将上述营养盐混合物溶解于上述基质水溶液，得中间混合溶液；

(4)将底栖硅藻接种到上述中间混合溶液中，得含有底栖硅藻的混合溶液；

(5)将钙化剂溶解于上述含有底栖硅藻的混合溶液中，得底栖硅藻半固体培养液；

(6)培养上述底栖硅藻半固体培养液。

进一步地，基质水溶液中基质、营养盐混合物、钙化剂的质量比为20：(0.8～1.5)：0.5。

进一步地，步骤(1)中，基质与水的质量比为1：400～600；优选的，基质与水的质量比为1：500。

进一步地，步骤(1)中，所述海藻酸钠和羧甲基纤维素钠的质量比为1：1。

进一步地，步骤(1)具体为：40～60℃，将海藻酸钠和羧甲基纤维素钠溶于水中，冷却至室温，得基质水溶液。

进一步地，步骤(2)中，所述营养盐混合物由包括如下重量份数原料组成：硅酸钠20～40份；硝酸钠30～60份；磷酸二氢钾5～10份；硫酸镁10～20份；柠檬酸铁铵0.5～2份。

进一步地，步骤(4)中，底栖硅藻按照体积比为1：1接种；接种密度为(0.5～1.0)×10⁶cell/mL。

进一步地，步骤(5)具体为，400～600r/min的条件下，钙化剂溶解于上述含有底栖硅藻的混合溶液；

优选的；所述钙化剂为氯化钙。

进一步地，步骤(6)中，培养时：温度为10～20℃，光暗比为(10～18)：(14-6)，光照强度为1000～2000LUX。