[发明专利]近红外频率上转换荧光分子探针、制备方法及用途

说明书

本发明公开了近红外频率上转换荧光分子探针、制备方法及用途。该探针的分子式为C₄₃H₄₀N₅O₆+，结构式如下。该检测谷胱甘肽S‑转移酶具有非常优异的选择性，响应效果好，近红外频率上转换荧光探针吸收和发射均在近红外区具有较强的生物体穿透性，具有较好的细胞成像效果。

技术领域

本发明涉及分子探针制备方法及用途，特别涉及近红外频率上转换荧光分子探针、制备方法及用途。

背景技术

谷胱甘肽S-转移酶(EC 2.5.1.18)是一类II期解毒酶，在降低毒性和通过催化谷胱甘肽与反应性代谢产物结合而促进尿排泄方面起着重要作用。同时，其在多种肿瘤组织中高表达并与肿瘤药物耐药性有着直接的关系。血液中的的谷胱甘肽S-转移酶含量通常可以诊断肝脏疾病，如肝损伤，肝癌等。因此，精准检测复杂生物样品及活体中的谷胱甘肽S-转移酶活性对疾病的治疗，谷胱甘肽S-转移酶抑制剂类药物的发现与评价和肝类疾病的快速诊断有着巨大的潜力。

目前检测谷胱甘肽S-转移酶的荧光探针多数都是短波长的，并且多数是下转换发光方式，这种探针在与谷胱甘肽S-转移酶响应后产生的荧光很难透过活体呈现出来，并且存在很多自体荧光的干扰。目前荧光探针与谷胱甘肽S-转移酶的响应方式有多种，以3，4-二硝基苯甲酰基团作为识别基团的频率上转换荧光分子探针检测谷胱甘肽S-转移酶可以免去生物体内和复杂生物样品的自发荧光干扰，增加了探针的实用性，但是如何得到性能更加优异的分子探针，还需要进一步研究。

发明内容

发明目的：本发明目的是提供对谷胱甘肽S-转移酶进行快速荧光响应检测的近红外频率上转换荧光分子探针。

本发明另一目的是提供所述近红外频率上转换荧光分子探针的制备方法和用途。

技术方案：本发明提供一种近红外频率上转换荧光分子探针，分子式为C₄₃H₄₀N₅O₆+，结构式如下：

所述的近红外频率上转换荧光分子探针的制备方法，包括如下步骤：

(1)在冰浴以及惰性气体保护条件下，将二氯甲烷和三乙胺加入到化合物1中，搅拌；

(2)在冰浴以及惰性气体保护条件下，加入3，4-二硝基苯甲酰氯，搅拌；

(3)去除冰浴条件，搅拌恢复至室温，反应；

(4)反应液进行萃取，取有机溶液层，蒸干溶剂，即得，

进一步地，所述步骤(3)中反应结束的时机为反应液中有沉淀。

进一步地，所述步骤(4)中萃取是向反应液中加入二氯甲烷溶液进行萃取。

进一步地，所述化合物1，二氯甲烷与三乙胺的体积比为1mmol∶5～8mL∶0.1～0.3mL。

进一步地，所述化合物1与3，4-二硝基苯甲酰氯的摩尔比为1∶3～5。

进一步地，所述惰性气体为氮气。

所述的近红外频率上转换荧光分子探针在制备检测谷胱甘肽S-转移酶药物中的用途。

进一步地，所述谷胱甘肽S-转移酶为溶液中、细胞中或者活体中的谷胱甘肽S-转移酶。

本发明荧光分子的结构为R-NNBA，其中R基为近红外荧光团：