[发明专利]用于广谱检测磺酰脲类药物的半抗原、人工抗原及其抗体和应用

说明书

本发明公开了用于广谱检测磺酰脲类药物的半抗原、人工抗原及其抗体和应用。本发明设计得到了一种用于检测磺酰脲类药物的半抗原，包括半抗原1和半抗原2，所述半抗原1的结构式如式(I)所示：所述半抗原2的结构式如式(II)所示：本发明在设计出的2个半抗原的基础上，利用碳二亚胺法将2种半抗原与载体蛋白偶联制备人工抗原，然后用2种人工抗原免疫新西兰兔得到2种针对7种磺酰脲类药物特异性完全互补的多克隆抗体，并根据这两种抗体的特性成功建立了一种用于广谱检测磺酰脲类药物的胶体金免疫层析试纸条快速检测方法，该方法能够简便、快速的同时检测7种磺酰脲类药物，应用前景良好。

技术领域

本发明属于食品药品安全检测技术领域。更具体地，涉及用于广谱检测磺酰脲类药物的半抗原、人工抗原及其抗体和应用。

背景技术

随着人类社会的不断发展，人们越来越重视自身的健康状况，而保健食品，作为一种具有调节人体功能的特殊食品，也越来越受到广大消费者的青睐。在众多门类的保健食品中，辅助降血糖保健食品由于含有益于糖尿病患者维持正常血糖水平的天然功效成分，受到了广大糖尿病患者的喜爱。而根据国际糖尿病联合会(IDF)发布的数据也显示，我国是全球糖尿病人数最多的国家，截止到2019年，患糖尿病的总人口数约为1.164亿人，因此，我国有着很大的辅助降糖类保健品消费市场。但是，有些不法商家为了追求高额的利润，在辅助降糖类保健品中添加一些西药成分，以达到保健食品远远不能达到的短期内见效显著的效果，而其中磺酰脲类药物是一类常见的违法添加物。

磺酰脲类(SUs)药物是临床上常用的2型糖尿病口服降糖药，具备共有的基本结构R₁-SO₂NHCONH-R₂，能够直接刺激胰岛分泌胰岛素来降低人体的血糖含量，并凭借着其价格低廉、作用迅速、效果持久的特点，在2型糖尿病人中占有广泛的市场。但长期、过量、与其他药物同服或不遵照合理服药时间服用，则极易产生不良反应；其最主要的不良反应是体重增加和低血糖，而严重的低血糖会引起病人神经兴奋度降低，以至昏迷和死亡。违法添加磺酰脲类药物最主要的急性危害来自于不确定的药物摄入量所引起的低血糖症状，此外，该类药物和常规药物一样都是通过肝脏代谢，并由肾脏清除。所以，对于那些肝或肾损害的晚期患者来说，在不知情的情况下摄入此类违法保健食品有可能导致肝肾的损害加重。因此，检测磺酰脲类药物在保健食品等产品中的添加量是必要的。

目前，应用于保健食品中磺酰脲类药物的检测方法主要有仪器检测方法和快速检测方法；然而，HPLC、HPLC-MS、HPLC-MS/MS等仪器检测方法虽然可以对样品中磺酰脲类物质进行精确定量，而且结果稳定，但前处理相对复杂，检测周期长，设备昂贵，同时还需要专业的技术人员进行操作，因此不利于基层机构的使用。快速检测方法包括薄层色谱(TLC)法和免疫检测方法，TLC是应用最早、最广泛的检测技术，是最经典的化合物检测方法，但其灵敏度低、重现性差、操作繁琐、时间长且安全性差，因此逐渐被质检机构淘汰；而免疫检测方法，由于其灵敏、快速、简单、方便等特点，逐渐成为快速检测方法的主流。

公开日为2011年3月16日、公开号为CN101986156A的中国发明专利公开了一种快速检测格列苯脲及其衍生物的胶体金层析试纸条及制备方法，但是该方法仅是针对一个磺酰脲类药物(格列苯脲)进行检测；公开日为2011年4月13日、公开号为CN102012427A的中国发明专利公开了一种格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡及其检测方法，该方法是将不同检测对象的几个方法通过物理连接方式合并在一起构成对两个或三个磺酰脲类降糖药的同时检测，其步骤复杂、能够同时检测的药物对象少、检测效率低；因此，提供一种能够同时检测7种磺酰脲类药物的免疫检测方法具有重要意义。

发明内容