[发明专利]与鸡球虫癸氧喹酯耐药性相关的SNP分子标记及其应用有效
| 申请号： | 202011017981.2 | 申请日： | 2020-09-24 |
| 公开（公告）号： | CN112176081B | 公开（公告）日： | 2022-05-13 |
| 发明（设计）人： | 刘贤勇;郝振凯;索勋;毕菲菲;孙霈;段春慧;张思新;胡丹丹;王思;汤新明;于咏兰 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6893 | 分类号： | C12Q1/6893;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 商秀玲 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鸡球虫癸氧喹酯 耐药性 相关 snp 分子 标记 及其 应用 | ||
1.与鸡球虫癸氧喹酯耐药性相关的SNP分子标记或引物对或含有所述引物对的试剂盒在非疾病诊断目的的检测鸡球虫癸氧喹酯耐药性中的应用；
所述SNP分子标记含有如SEQ ID NO.1所示序列第379位多态性为G/C的核苷酸序列，所述SNP分子标记的多态性位点为G，对应于癸氧喹酯敏感；多态性位点为C，对应于癸氧喹酯耐药；
所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.2-3所示，或者如SEQ ID NO.16-17所示。
2.与鸡球虫癸氧喹酯耐药性相关的SNP分子标记或引物对或含有所述引物对的试剂盒在非疾病诊断目的的筛选鸡球虫癸氧喹酯耐药性虫株中的应用；
所述SNP分子标记含有如SEQ ID NO.1所示序列第379位多态性为G/C的核苷酸序列，所述SNP分子标记的多态性位点为G，对应于癸氧喹酯敏感；多态性位点为C，对应于癸氧喹酯耐药；
所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.2-3所示，或者如SEQ ID NO.16-17所示。
3.一种非疾病诊断目的的检测鸡球虫癸氧喹酯耐药性的方法，其特征在于，以待测鸡球虫的DNA为模板，采用SEQ ID NO.2-3所示引物对或SEQ ID NO.16-17所示引物对进行PCR扩增，根据PCR扩增产物的序列判断待测鸡球虫是否具有癸氧喹酯耐药性；
若PCR扩增产物中对应于SEQ ID NO.1所示序列第379位的核苷酸序列为G，则待测球虫为癸氧喹酯敏感虫株，若PCR扩增产物中对应于SEQ ID NO.1所示序列第379位的核苷酸序列为C，则待测球虫为癸氧喹酯耐药虫株。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应程序包括：98℃，30-60s；98℃，15-30s；65℃，20-30s；72℃， 25-35s，30-40个循环；72℃，5-10min。
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