[发明专利]一种水稻白叶枯病抗性基因Xa1的分子标记、扩增引物及其应用有效
| 申请号: | 202011016624.4 | 申请日: | 2020-09-24 |
| 公开(公告)号: | CN111996284B | 公开(公告)日: | 2021-08-06 |
| 发明(设计)人: | 章孟臣;杨窑龙;王珊;魏兴华 | 申请(专利权)人: | 中国水稻研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 任霜 |
| 地址: | 311401 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 水稻 白叶枯病 抗性 基因 xa1 分子 标记 扩增 引物 及其 应用 | ||
1.一种水稻白叶枯病抗性基因Xa1的分子标记,其特征在于,所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID No:3所示。
2.一种用于扩增水稻白叶枯病抗性基因Xa1的分子标记的引物,包括上游引物和下游引物,其特征在于,所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No:1所示;所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No:2所示。
3.权利要求1所述分子标记或权利要求2所述引物在辅助水稻育种中的应用。
4.权利要求1所述分子标记或权利要求2所述引物在水稻种质资源鉴定中的应用。
5.权利要求1所述分子标记或权利要求2所述引物在鉴定水稻白叶枯病抗性基因Xa1基因型中的应用。
6.一种鉴定水稻白叶枯病抗性基因Xa1基因型的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)利用权利要求2所述引物对待测水稻样品基因组DNA进行PCR扩增,获得扩增产物;
2)对所述扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据电泳图中扩增条带的大小判断水稻的抗性:
当检测到472bp条带,则所述待测水稻样品含有Xa1抗病等位基因。
7.根据权利要求6所述方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应程序为94℃预变性4min;95℃变性15s,55℃退火30s,72℃延伸30s,30个循环;最后72℃延伸5min。
8.根据权利要求6或7所述方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应体系为10μL,具体如下:10×PCR反应缓冲液1μL、DNA模板1μL、2.5mmol/L dNTP 1μL、5.0μmol/L上游引物1μL、5.0μmol/L下游引物1μL、Taq DNA聚合酶0.25μL和ddH2O 4.75μL。
9.根据权利要求6或7所述方法,其特征在于,所述琼脂糖凝胶的质量浓度为2%。
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