[发明专利]一株嗜吡啶红球菌及其在生产PHBV中的应用有效
| 申请号: | 202011012430.7 | 申请日: | 2020-09-24 |
| 公开(公告)号: | CN112063567B | 公开(公告)日: | 2022-01-04 |
| 发明(设计)人: | 郭文斌;邵宗泽 | 申请(专利权)人: | 自然资源部第三海洋研究所;中国大洋矿产资源研究开发协会(中国大洋事务管理局) |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P7/62;C12R1/01 |
| 代理公司: | 厦门市宽信知识产权代理有限公司 35246 | 代理人: | 巫丽青;宁霞光 |
| 地址: | 361000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一株嗜 吡啶 球菌 及其 生产 phbv 中的 应用 | ||
1.一株嗜吡啶红球菌,其特征在于,所述嗜吡啶红球菌命名为嗜吡啶红球菌(Rhodococcus pyridinivorans) P23,在中国典型培养物保藏中心登记保藏,保藏号为CCTCC NO:M2019609。
2.根据权利要求1所述一株嗜吡啶红球菌,其特征在于,所述菌的16S rDNA序列如SEQID NO:1所示。
3.如权利要求1所述嗜吡啶红球菌(Rhodococcus pyridinivorans) P23在生产PHBV中的应用,所述PHBV为3-羟基丁酸和3-羟基戊酸的共聚物。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述PHBV的合成底物为对苯二甲酸和/或对苯二甲酸盐。
5. 一种制备PHBV的方法,其特征在于,包括以下步骤:发酵培养如权利要求1所述嗜吡啶红球菌(Rhodococcus pyridinivorans) P23,分离纯化PHBV。
6.根据权利要求5所述一种制备PHBV的方法,其特征在于,制备PHBV的方法中,发酵温度为25-40℃;发酵体系的pH值为6.0- 9.0;发酵体系溶解氧为20%- 100%,发酵时间为24-96 小时。
7.根据权利要求5或6所述一种制备PHBV的方法,其特征在于,所述发酵培养嗜吡啶红球菌(Rhodococcus pyridinivorans) P23的方法为:
(1)将嗜吡啶红球菌(Rhodococcus pyridinivorans) P23接入种子培养基进行发酵培养;
(2)将步骤(1)中的种子转接到发酵培养基中进行发酵培养。
8.根据权利要求7所述一种制备PHBV的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的种子培养基为2216E培养基,每升含蛋白胨5.0g,酵母粉1.0g,柠檬酸铁 0.1g,氯化钠 19.45g,氯化镁5.98g,硫酸钠3.24g,氯化钙1.8g,氯化钾0.55g,碳酸钠0.16g,溴化钾0.08g,氯化锶0.034g,硼酸0.022g,硅酸钠0.004g,氟化钠0.0024g,硝酸钠0.0016g,磷酸氢二钠0.008g,用水定容至1升,pH值7.6±0.2;和/或,
所述步骤(2)中的发酵培养基由氯化钠5.0- 50.0 g,六水合氯化镁1.0- 10.0 g,氯化钙0.1- 2.0 g,硫酸钠0.5- 5.0 g,氯化铵0.1- 5.0 g,磷酸二氢钾0.1- 20.0 g,氯化钾0.5- 10.0 g,微量元素0.5- 3.0毫升,对苯二甲酸和/或对苯二甲酸盐5.0- 30.0 g和水组成,用水定容至1升;和/或,
所述步骤(2)中步骤(1)培养的种子以1%的接种量转接到发酵培养基中。
9.根据权利要求8所述一种制备PHBV的方法,其特征在于,所述微量元素按如下方法制备:将乙二胺四乙酸1.0- 10.0 g,硼酸2.0- 50.0 mg,四水合氯化锰2.0- 50.0 mg,七水合硫酸亚铁1.0- 5.0 g,六水合氯化钴100.0- 1000.0 mg,六水合氯化镍10.0- 100.0 mg,二水合氯化铜2.0- 50.0 mg,七水合硫酸锌2.0- 50.0 mg,二水合钼酸钠2.0- 50.0 mg和0.5mol/L的盐酸水溶液混合,用0.5 mol/L的盐酸水溶液补足至1升。
10.根据权利要求5或6所述一种制备PHBV的方法,其特征在于,所述分离纯化PHBV的方法是发酵结束后离心获得菌体,冷冻干燥菌体后利用氯仿进行抽提,过滤菌体后旋转蒸发浓缩,利用冷甲醇进行沉淀获得PHBV。
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