[发明专利]一种全血基因组DNA提取方法

说明书

本发明公开了一种全血基因组DNA提取方法，包括以下步骤：首先向全血样本中加入血液抗凝剂；取80‑200ul新鲜全血样本置于2ml离心管中，并将其置于离心机内进行离心，而后移除上清液，保留沉淀；向步骤S2中制得的沉淀中添加100‑300ul的裂解液和100‑300mg/ml的纳米磁珠20‑50ul，振荡混匀1min，而后室温静置；将步骤S3的离心管置于磁力架上，待纳米磁珠完全吸附后，使用无菌移液枪头移除上清液，并向沉淀中加入600‑1200ul洗涤液，而后通过离心机进行振荡混匀1min；将步骤S4离心管置于磁力架上。本发明在DNA提取的过程中，其提取纯化步骤简单便捷，且提取的DNA完整度较好，含量高，方便实验人员后续的使用，操作过程耗时短，便于操作和使用，且在操作的过程中使用的有毒试剂较少，较为安全。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种全血基因组DNA提取方法。

背景技术

核酸是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。核酸提取是指利用物理、化学方法将核算从载体中分离出来的过程。目前，在国内大部分医疗机构及科研领域均需要从大批量血液样本中提取核酸。因此，为了保证抽提出高浓度的核酸，人们不断开发出新的技术。

核酸测序技术如今已成为生物学研究领域的强大助手，第二代高通量测序技术的应用已取得诸多可喜可贺的成果，但技术原理决定了二代测序存在诸多弊端，如测序读长短、反复PCR扩增造成的扩增偏好性、难以覆盖高GC含量和重复序列区域等。而第三代高通量测序技术的出现，可以完美解决这些问题，其测序读长10～60kb甚至更长，无PCR扩增过程无GC偏向性等，在基因组的组装上对比二代有无与伦比的优势，也因为如此，三代测序对起始DNA样品的要求极高，尤其是在总量、纯度和完整度上。

但现有的DNA提取方式或存在使用较多致毒试剂，或存在提取的DNA不完整等缺点，为此我们提出一种全血基因组DNA提取方法。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种全血基因组DNA提取方法。

本发明提出的一种全血基因组DNA提取方法，包括以下步骤：

S1、首先向全血样本中加入血液抗凝剂；

S2、取80-200ul新鲜全血样本置于2ml离心管中，并将其置于离心机内进行离心，而后移除上清液，保留沉淀；

S3、向步骤S2中制得的沉淀中添加100-300ul的裂解液和100-300mg/ml的纳米磁珠20-50ul，振荡混匀1min，而后室温静置；

S4、将步骤S3的离心管置于磁力架上，待纳米磁珠完全吸附后，使用无菌移液枪头移除上清液，并向沉淀中加入600-1200ul洗涤液，而后通过离心机进行振荡混匀1min；

S5、将步骤S4离心管置于磁力架上，纳米磁珠完全吸至管壁上时，通过无菌移液枪将上清液吸弃，并将处理后的离心管置于烘干机内进行烘干，直至管内无液体残留；

S6、向S5离心管内加入100-300ul洗脱液；

S7、向步骤S6离心管中置于50-65℃水浴30-50min水浴处理，而后冷却后添加有机溶剂进行抽提，并对离心管进行离心处理，离心处理后置于磁力架上待纳米磁珠完全吸附后，提取上清液，则获取DNA基因组。

优选的，所述血液抗凝剂为血液抗凝易用柠檬酸抗凝液。

优选的，所述步骤S2中的离心速率为8000-12000r/min，且离心过程中温度大于20℃。