[发明专利]一种测定有机磷的方法

权利要求书

1.一种测定有机磷含量的方法，其特征在于，方法包括以下步骤：将有机磷溶液与乙酰胆碱酯酶AChE溶液混合均匀并孵育，然后加入乙酰胆碱ACh溶液与胆碱氧化酶ChOx溶液得到酶反应液，并将酶反应液与二价铁盐溶液依次加入PAA-UCNPs纳米材料溶液中，避光反应12～18min，待反应结束，测定反应液的荧光强度，根据荧光强度测定有机磷含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述有机磷为有机磷农药。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述有机磷农药包括毒死蜱、甲基对硫磷、敌百虫、敌敌畏、乐果或马拉硫磷。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述PAA-UCNP纳米材料通过以下方法制备得到：

(1)油酸OA包裹的NaYF₄:Yb,Er上转换纳米材料OA-UCNPs的制备

S1:分别称取YbCl₃·6H₂O、YCl₃·6H₂O和ErCl₃·7H₂O加入到反应瓶中，加入油酸OA及十八烯1-ODE，之后在惰性气体保护下混合搅拌，并逐渐升温至150～160℃，待试剂溶解混合均匀之后降温至室温，得到混合物1；

S2:称取NH₄F和NaOH溶于10mL甲醇溶液中，逐滴加入到混合物1中，同时升温至50～60℃、并反应30～60min，之后去除甲醇和残余水分，继续升温至300～310℃，持续反应0.5～1h；待反应结束后冷却至室温，加入乙醇，将纳米晶体离心沉淀，再用环己烷/乙醇混合物清洗至少3次，并于60～70℃下烘干4～8h，得到NaYF₄:Yb,Er上转换纳米材料OA-UCNPs；

(2)PAA-UCNPs的制备

将200～300mg聚丙烯酸PAA与10mL的无水乙醇溶液混合搅拌至完全溶解得到溶液1，然后将30mg OA-UCNPs均匀分散在3～5mL氯仿溶液中，并加入溶液1中，避光搅拌反应20～24h，固液分离取固相，最后用水洗涤固相至少3次，即得到PAA-UCNPs纳米材料。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(1)S1中所述YbCl₃·6H₂O、YCl₃·6H₂O与ErCl₃·7H₂O摩尔比为9：40：1；所述油酸OA与十八烯1-ODE体积比为6：14～17。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(1)S1中所述NH₄F与NaOH的摩尔比为8：5。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述测定有机磷的具体方法为：

步骤1：将有机磷溶液与AChE溶液混合孵育，然后向所得溶液中加入ACh溶液和ChOx溶液，在37℃孵育14～16min得到酶反应液；

步骤2：将超声分散均匀的PAA-UCNPs与盐酸溶液混合，得到溶液1；

步骤3：将步骤1中所得酶反应液与二价铁溶液依次加入步骤2所得溶液1中，避光振荡反应12～18min，反应结束后测定最终反应液的荧光强度。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤1中所述AChE浓度为1.5～2U/mL；所述ACh溶液浓度为40～60mmol/L；所述ChOx溶液浓度为1.2～1.5U/mL。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤2中所述PAA-UCNPs溶液浓度为1mg/mL。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤2中所述二价铁溶液为FeCl₂溶液、Fe(NO₃)₂溶液或FeSO₄溶液中的至少一种。