[发明专利]一种俄色果的质量检测方法

说明书

本发明提供了一种俄色果的质量检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：1)对照品溶液的制备：取枸杞酸对照品，加水溶解，作为对照品溶液；2)供试品溶液的制备：取待测样品，加水提取，过滤，取续滤液作为供试品溶液；3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B梯度洗脱。本发明俄色果饮片的质量检测方法，以枸杞酸作为俄色果及其饮片的测定指标，具有良好的生物活性和一定的专属性，为俄色果饮片的质量控制提供了更加简单，有效的方法，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明具体涉及一种俄色果的质量检测方法。

背景技术

俄色果是蔷薇科苹果属植物变叶海棠Malus toringoides(Rehd.)Hughes.或花叶海棠Malus transitoria(Batal.)Schneid.的干燥成熟果实，作为甘孜藏族自治州藏族民间习用药材，在该地区使用历史悠久，其黄酮类具有降血糖、抗氧化、保肝等作用。专利CN109060985A公开了一种俄色果质量检测方法，该方法通过分离俄色果中的黄酮类化合物，达到质量检测的目的，但经研究发现俄色果中还含有枸杞酸(2-O-β-D-Glucopyranosyl-L-ascorbic Acid)，该成分为首次在蔷薇科植物中发现，也是首次在俄色果中发现。

据文献报道，枸杞酸是真正意义上源于天然的、稳定的抗坏血酸衍生物，具有保肝、抗氧化、降血糖等功效，具有较好的生物活性和一定的专属性。而目前还没有以枸杞酸判断俄色果及其饮片质量的方法。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种俄色果的质量检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：

1)对照品溶液的制备：取枸杞酸对照品，加水溶解，作为对照品溶液；

2)供试品溶液的制备：取待测样品，粉碎过筛，加水提取，过滤，取续滤液作为供试品溶液；

3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B梯度洗脱；梯度洗脱程序如下：

进一步地，步骤1)所述对照品溶液每1ml含枸杞酸0.5～2mg，优选1mg。

进一步地，步骤2)所述待测样品为俄色果或其饮片；所述待测样品与水的质量体积比为0.2-1.2g：25ml，优选0.5g：25ml。

进一步地，步骤2)所述过筛为过4号筛。

进一步地，步骤2)所述提取为超声提取，超声提取功率500W，频率40kHz，时间45min。

进一步地，步骤3)所述注入液相色谱仪的溶液体积为10～20μ；所述色谱条件的检测波长为235nm，流动相流速0.5mL/min，柱温为25-30℃；所述色谱柱为InertSustain C18柱，规格4.6mm×250mm，5μm。

更进一步地，步骤3)所述注入液相色谱仪的溶液体积为10μl；所述色谱条件的柱温为25℃。

本发明还提供了一种俄色果和/或俄色果饮片中枸杞酸的含量测定方法，它包括如下步骤：

a、取步骤1)对照品溶液，用水配制成系列浓度对照品溶液,注入高效液相色谱仪，按照步骤3)色谱条件检测，测定峰面积，得到枸杞酸的标准曲线方程；

b、取待测样品，按照步骤2)制备供试品溶液，步骤3)色谱条件检测，测定峰面积，再根据步骤a)标准曲线方程计算待测样品中枸杞酸含量。