[发明专利]一种涎液化糖链抗原测定试剂盒及其检测方法

说明书

本发明涉及体外诊断试剂技术领域，尤其涉及一种涎液化糖链抗原测定试剂盒及其检测方法。本发明的涎液化糖链抗原检测试剂盒，包括试剂R1、试剂R2；试剂R1包括：稳定剂5～50g/L、防腐剂0.05～2g/L，并利用缓冲液调节pH为2～9；试剂R2包括：表面活性剂5～30g/L、稳定剂5～30g/L、抗人涎液化糖链抗原抗体乳胶颗粒结合物0.1～2g/L、防腐剂0.05～2g/L，并利用缓冲液调节pH为2～9。本发明试剂盒灵敏度高，最低检测能够达到50.0U/mL，且线性范围广，可达50～10000U/mL，可实现对涎液化糖链抗原的准确检测。

技术领域

本发明涉及体外诊断试剂技术领域，尤其涉及一种涎液化糖链抗原测定试剂盒及其检测方法。

背景技术

涎液化糖链抗原(Krebs Von Den Lungen-6，KL-6)是一种跨膜高分子量黏蛋白，含有分子量约为200KD的唾液酸化糖链，该糖链主要是由20个氨基酸残基组成的串联重复序列，具有被特异性抗体识别的空间结构表位。KL-6在肺支气管上皮的膜表面二硫键处形成肺支气管上皮被覆液，主要表达于Ⅱ型肺泡细胞和支气管上皮细胞的细胞质和胞膜。有研究指出，KL-6不仅是构成肺组织间质的蛋白质，还可作为肺组织高度特异性的标志。

间质性肺炎(IP)是以肺间质为主要病变部位的疾病。正常肺泡壁出现炎症或损伤后，肺间质逐渐变厚、变硬，随着病情恶化肺部会出现纤维化，从而引起肺部通气功能障碍，导致供氧不足，表现出呼吸困难等症状。间质性肺炎已知的病因包括自身免疫疾病引起、长期吸入粉尘颗粒物、以及使用药物(抗癌药、免疫抑制剂等)。患者表现为活动后气嘴、日常干咳，药物副作用加重等症状。

KL-6可以对肺间质状态进行检测，帮助选择治疗药物，也可用于判断停药时间。当发生间质性肺炎等情况时，肺泡上皮细胞受到损伤后会向血液中释放KL-6，使血液中KL-6蛋白的浓度升高。活动期的间质性肺炎患者血液中存在高浓度的KL-6，有效的治疗可以降低测定值。

近年来，随着医学各种检查技术的不断发展，尤其是肺部影像学如高分辨CT在临床中的广泛应用，提高了间质性肺炎患者早期诊断准确率，但间质性肺炎治疗并未取得实质性进展，部分患者的预后差，死亡率高。早期诊断和治疗可改善患者预后，故目前除临床已用于间质性肺炎诊断的肺CT、肺功能、血气分析、支气管镜及肺活检等手段外，与间质性肺炎疾病发展及转归有关的血清学检测亦成为研究热点，目前，有许多研究者认为KL-6在间质性肺炎的早期诊断及病变程度、发生、进展、药物疗效及预后评价均有重要价值。

目前现有技术中，涎液化糖链抗原的检测方法有酶联免疫吸附测定(ELISA)、化学发光免疫分析法(CLIA)和免疫浊度法(INA、ITA)。在酶联免疫吸附测定中，其检测灵敏度高，但操作过程略显复杂、测定时间较长、影响因素多，且此法主要应用于科学研究，不能用于临床诊断；在化学发光免疫分析法测定中，其自动化操作速度快、准确度高，但是成本高、设备昂贵、稳定性较差，无法普及中基层医院及医疗机构；免疫浊度法又可分为散射比浊(INA)和透射比浊(ITA)，这类方法的优点是快速简便，精密度高、易于自动化，适于大批量标本的同时检测，也可进行少量样本和急诊样本的测定，具有很强的适用性。散射比浊(INA)法由于其光波接收方式的特点，通常测试结果的灵敏度与测速要优于透射比浊，但需要专门仪器的散射比浊仪或特种蛋白仪，与专用配套试剂，测定成本较高，不易于在基层医院中推广使用。透射比浊(ITA)法，操作简便适用性强，普通自动生化分析仪和分光光度计均可使用，更易于被常规分析所采用，几乎所有的各实验室、基层医院均能开展，不足的是灵敏度和精密度均不够理想。

因此，亟待在现有的涎液化糖链抗原胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒的制备基础上进行改良，提高涎液化糖链抗原检测试剂盒的灵敏度、精密度、适用性是目前的市场需求。

发明内容

因此，针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种涎液化糖链抗原测定试剂盒及其检测方法，可以实现对涎液化糖链抗原的准确检测。