[发明专利]一种细菌荚膜染色方法及其用途

权利要求书

1.一种高毒力肺炎克雷伯菌荚膜染色方法，包括以下步骤：

S1：先将1-3滴A液滴加于洁净玻片上，后将细菌加入所述A液中涂匀；

S2：将所述步骤S1得玻片自然干燥；

S3：用B液涂抹所述步骤S2得玻片，染色3-6min；

S4：用水冲洗所述步骤S3得玻片后二次自然干燥；

S5：将步骤S4得玻片置于光学显微镜下镜检；

所述A液为：将碱性刚果红溶于蒸馏水中形成，刚果红和蒸馏水的用量比为0.8-1.1g:100mL；所述B液为：将酸性品红、氯化铁、乙酸和液化苯酚混合均匀形成，品红、氯化铁、乙酸和液化苯酚的用量比为0.014-0.020g:1g:1.5-1.8mL:1.0-1.5mL；

所述染色方法的染色效果为：背景红色、菌体红色、荚膜白色。

2.根据权利要求1所述的一种高毒力肺炎克雷伯菌荚膜染色方法，其特征是：所述液化苯酚的制备方法为：取900g苯酚于广口瓶中，加水适量，置水浴上缓缓加热，液化后，放冷，添加适量的水，使成1000g，搅匀，即得。

3.权利要求1或2所述的荚膜染色方法在鉴别高毒力肺炎克雷伯菌中的用途。

4.一种高毒力肺炎克雷伯菌荚膜染色液，包括：

-A液，将碱性刚果红溶于蒸馏水中形成；

-B液，将酸性品红、氯化铁、乙酸和液化苯酚混合均匀形成；

其中，所述A液中刚果红和蒸馏水的用量比为0.8-1.1g:100mL；

所述B液中品红、氯化铁、乙酸和液化苯酚的用量比为0.014-0.020g:1g:1.5-1.8mL:1.0-1.5mL。

5.根据权利要求4所述的一种高毒力肺炎克雷伯菌荚膜染色液，其特征是：所述B液中加入甜菊糖苷和曲酸。

6.根据权利要求5所述的一种高毒力肺炎克雷伯菌荚膜染色液，其特征是：所述B液中甜菊糖苷、曲酸和品红的质量比为0.1-0.2:1.3-1.6:1。

7.一种快速鉴别高毒力肺炎克雷伯菌的方法，包括以下步骤：

S1：先将1-3滴权利要求1或2中所述A液滴加于洁净玻片上，后将细菌加入所述A液中涂匀；

S2：将所述S1步骤得玻片自然干燥；

S3：用权利要求1或2中所述B液涂抹所述S2步骤得玻片，染色3-6min；

S4：用水冲洗所述S3步骤得玻片后二次自然干燥；

S5：将S4步骤得玻片置于油镜下镜检。

8.根据权利要求7所述的一种快速鉴别高毒力肺炎克雷伯菌的方法，其特征是：所述肺炎克雷伯菌鉴别前在哥伦比亚血琼脂上，在35-40℃、5％CO₂的孵箱中培育培养18-32h。

9.根据权利要求7所述的一种快速鉴别高毒力肺炎克雷伯菌的方法，其特征是：所述B液中加入甜菊糖苷和曲酸。

10.根据权利要求9所述的一种快速鉴别高毒力肺炎克雷伯菌的方法，其特征是：所述B液中甜菊糖苷、曲酸和品红的质量比为0.1-0.2:1.3-1.6:1。

11.根据权利要求7所述的一种快速鉴别高毒力肺炎克雷伯菌的方法，其特征是：所述高毒力株菌的荚膜厚度大于经典型株菌。