[发明专利]一种欧洲越橘提取物、中国越橘提取物的鉴别和其混合物中比例的测定方法

说明书

本发明公开了一种鉴别欧洲越橘提取物和中国越橘提取物的方法，也可以进一步对其混合物进行比例的测定。包括步骤待测溶液的配制；以高效液相色谱仪对待测溶液进行分析；通过分析图谱中保留时间21分钟之前的峰，进行鉴别待测溶液中越橘提取物的种类；根据峰面积比推算越橘提取物中来源，推导待测溶液中各组分的比例。本发明的方法的操作性强，过程方便快捷，适用范围广。

技术领域

本发明属于生物鉴别技术领域，具体涉及欧洲越橘提取物、中国越橘提取物的鉴别和其混合物中比例的测定方法。

背景技术

越桔是杜鹃花科植物，原产北美，常绿矮小灌木。环北极分布，自北欧、中欧、北美至格陵兰岛和亚洲。

越橘提取物富含花青素，越橘花青素中的色素物质，主要为花青素-2-葡萄糖苷、花青素-3-木糖苷、花青素-3-半郛糖苷、花青素-2-鼠李糖苷、翠雀花-3-鼠李糖苷、翠雀花-5-葡萄糖苷、3-O-酰原花翠素、锦葵色素-3、5-二糖甙和3、3-二-酰原花萃素等。越橘花青素是高级医药中间体，有助于维持毛细血管完整性和稳定胶原质。花青素也是有力的抗氧化剂。

越橘提取物又分为中国越橘提取物和欧洲越橘提取物。两者市场价格存在较大差异。常规含量检测是用UV法去检测其中花青素的含量，无法进行区分。少数不法厂商会用中国越橘提取物或者其混合物代替纯欧洲越橘提前物进行销售。

本法正是针对这一问题，提出了解决办法，对欧洲越橘和中国越橘进行鉴别，也可以进一步对其混合物进行比例的测定。

发明内容

发明目的：为了克服现有技术中存在的不足，本发明提供欧洲越橘提取物、中国越橘提取物的鉴别和其混合物中比例的测定方法。

技术方案：为实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：一种越橘提取物种类鉴别方法，其包括如下步骤，待测溶液的配制；以高效液相色谱仪对待测溶液进行分析；通过分析图谱中保留时间21分钟之前的峰，进行鉴别待测溶液中越橘提取物的种类；根据峰面积比推算越橘提取物中来源；所述进行高效液相色谱分析，其色谱条件的流动相包括第一流动相和第二流动相，所述第一流动相为甲酸溶液，所述第二流动项为乙腈、甲醇、甲酸的混合水溶液。

优选的，按体积比计，所述第一流动相中水比甲酸为9：1，所述第二流动项中水、乙腈、甲醇、甲酸的比为160:90:90:40。

优选的，所述色谱条件还包括，

波长：535nm

色谱柱：C₁₈ 4.6mm×150mm 5μm

流速：1.0ml/min

柱温：30℃

进样量：20μl。

优选的，所述越橘提取物来源于欧洲越橘和/或中国越橘。

优选的，所述中国越橘，其提取物中包括保留时间为19.540-19.855min的物质。

优选的，所述中国越橘，其提取物中不包括氯化飞燕草素-3-O-半乳糖苷、氯化飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、氯化矢车菊素-3-O-半乳糖苷、氯化飞燕草素-3-O-阿拉伯糖苷中的一种或几种。

优选的，所述越橘提取物，其提取工艺为，(1)第1次提取：取越橘果实100g，破碎后加入0.2％盐酸的乙醇溶液1000ml，60℃水浴提取3小时，抽滤，收集抽滤液，滤渣备用；(2)第2次提取：将第1次提取的滤渣，加入0.2％盐酸的乙醇溶液1000ml，60℃水浴提取3小时，抽滤，收集抽滤液，滤渣弃去；(3)浓缩液的制备：将两次抽滤液合并，减压蒸发至无醇浓缩液；(4)提纯：浓缩液上大孔吸附树脂吸附，再用乙醇溶液解吸，收集洗脱液；(5)浓缩：洗脱液减压蒸发至无醇，干燥即得欧洲越橘提取物。