[发明专利]一种高效抗体粉的制备方法

说明书

本发明公开了一种高效抗体粉的制备方法，包括制备抗体蛋液、制备红法夫酵母种子液，并将红法夫酵母种子液接种到抗体蛋液中，对抗体蛋液进行发酵处理，最后经喷干制得抗体粉。通过对抗体蛋液进行发酵处理，酵母发酵与抗体蛋液有效结合，克服了抗体蛋液制备抗体粉的诸多劣势，经过酵母处理后的抗体蛋液制备的抗体粉，不仅效价值更高，其水溶性也明显得到提高，并且延长了高温下的保存时间。

技术领域

本发明涉及卵黄抗体技术领域，特别是涉及一种高效抗体粉的制备方法。

背景技术

卵黄抗体（IgY）是禽类为了保护其后代在新生期不受外界环境的病原微生物侵袭而产生的特殊抗病机制。蛋黄中的卵黄抗体与哺乳动物初乳中的抗体一样，都是由母体产生，通过特殊机制从血液中转运而来。用特异的抗原物质多次免疫母禽后，所产蛋黄中特异抗体的含量会显著增加。经过免疫后的母鸡下的蛋有大量的卵黄抗体，将这些整蛋液经过一定的工艺制成粉，此粉即是抗体粉，抗体粉通过口服进入动物体内后能被快速吸收入血，发挥杀灭病毒、细菌和中和毒素等作用。因此，抗体粉是一种天然存在、无残留、无毒副作用的免疫球蛋白,是抗生素的潜在替代品,己广泛应用于人类和动物的疾病防治、诊断及治疗，抗体粉作为一种高效的生物防治剂己经被广泛应用。

经过免疫后的鸡蛋液含有大量的卵黄抗体，用喷雾干燥法制备成抗体粉可以延长保存时间，方便使用，但抗体粉的水溶性差，经过喷雾干燥后效价有一定的损失，抗体粉在一定高温下随着时间的延长其效价逐渐降低。这些因素导致抗体粉的应用受到一定的限制。

本专利基于此经过大量的实验与验证，发现一种特殊的酵母在抗体蛋液喷干制备抗体粉前，对抗体蛋液进行一定的发酵处理工艺，酵母发酵与抗体蛋液有效结合，克服了抗体蛋液制备抗体粉的上述劣势，经过特殊酵母处理后的抗体蛋液制备的抗体粉，其效价值较高，水溶性得到提高，在一定高温下延长了保存时间。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种高效抗体粉的制备方法，通过对抗体蛋液进行发酵处理，酵母发酵与抗体蛋液有效结合，克服了抗体蛋液制备抗体粉的上述劣势，经过酵母处理后的抗体蛋液制备的抗体粉，不仅效价值更高，其水溶性也明显得到提高，并且延长了高温下的保存时间。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种高效抗体粉的制备方法，包括以下步骤：

S1 制备抗体蛋液：

S11 通过鸡胚扩增获得大量腺病毒，并对其进行灭活，制备待免疫鸡只的腺病毒疫苗；

S12 选取200多日龄的母鸡用腺病毒疫苗进行免疫，第一次免疫注射疫苗剂量为0.5ml，期间间隔半月，进行第二次注射0.3ml，之后间隔十天进行第三次注射疫苗0.3ml，此时检测鸡蛋效价值，效价值较高且稳定时收集高效价鸡蛋；

S13先用消毒剂进行鸡蛋表面消毒，后用打蛋器对鸡蛋进行破碎，收集整蛋液（蛋清与蛋黄混合液），加蛋液体积三分之一比例的水，搅拌均匀，用筛子对其进行过滤获得整蛋液，备用；

S2 制备红法夫酵母种子液：

S21 红法夫酵母菌种发酵前活化：将法夫红酵母种子在固体培养基中活化三次,活化温度为26℃活化时间为42小时，获得纯化的菌株，然后将菌株接种到固体培养基中，固体培养基如下质量百分含量的组分组成：马铃薯浸粉0.6%、葡萄糖2%、琼脂2%，在26℃的恒温培养箱中培养48小时，备用；

S22红法夫酵母种子液制备：将培养后的红法夫酵母菌株，接种在种子液培养基中，初始pH值5.0，培养温度为26℃，摇床转速为180rpm/min，培养52小时，得到红法夫酵母种子液；

其中种子液培养基采用如下质量百分含量的组分组成：葡萄糖2%，酵母浸膏0.3%，蛋白胨0.8%，氯化钠0.15%，磷酸二氢钾0.2%；