[发明专利]骨相关间充质干细胞CD166+

说明书

本发明涉及骨相关间充质干细胞CD166⁺亚群的制备及其应用，所涉及的制备包括利用抗‑CD45抗体、抗‑Ter119抗体和抗‑CD166抗体对骨相关间充质干细胞进行分选得到骨相关间充质干细胞CD166⁺亚群。所涉及的应用是骨相关间充质干细胞CD166⁺亚群用于制备治疗炎症性肠病的应用。

技术领域

本发明涉及骨相关间充质干细胞，具体涉及骨相关间充质干细胞CD166⁺亚群的制备及应用。

背景技术

炎症性肠病(inflammatory bowel disease，IBD)是常见消化系统疾病，一种慢性非特异性的肠道炎症性疾病，目前病因不明，发病机制尚不十分清楚。 IBD好发于青壮年人群，有溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)和克罗恩病(Crohn's disease，CD)两种临床亚型。

IBD常有腹痛、腹泻等典型消化道症状，病情加重时可出现发热、消瘦等全身体征，部分患者还可出现泌尿、呼吸及皮肤等消化系统外症状。IBD 易反复发作、迁延不愈，病程往往较长。当病情迁延时，患者可出现肠道穿孔、梗阻、腹腔脓肿，甚至是中毒性巨结肠、直结肠癌变等并发症，严重影响患者的生活质量，对患者造成极大的精神痛苦。因此探索安全有效的IBD 治疗方案，显得十分迫切和必要。

现有IBD治疗方案存在较多不足当前IBD以逐步升级的药物治疗为主，包括抗炎类药物(氨基水杨酸、糖皮质激素)和免疫抑制剂(硫唑嘌呤)等。对于激素、免疫抑制剂治疗无效或激素依赖、不能耐受上述药物治疗的患者，则使用生物制剂如TNF-α单抗来治疗，但该方法的长期应用效果并不理想。而对于药物治疗无法控制的IBD患者，只能采用外科手术来治疗，术后造瘘以及并发症等，都会严重降低患者的生活质量。另一方面，药物治疗虽然可以缓解IBD的临床症状，但难以彻底治愈IBD；而且很多药物的副作用较大，因为激素类药物长期使用容易产生多种不良反应，如高血压、糖尿病、骨质疏松等；嘌呤类药物的长期应用可能会增加血液病、皮肤癌、泌尿系统肿瘤及宫颈癌等恶性肿瘤发生的风险；生物制剂如单抗会引起头痛、恶心、上呼吸道感染、红斑狼疮等不良反应发生。这些药物副作用并不利于原发病的治疗。因此，临床上亟需新的治疗策略，以延长IBD缓解期时间，减少毒副作用，提高IBD患者生活质量。

现有技术中MSCs对IBD具有一定的临床治疗效果，但是预后并不稳定。

发明内容

针对现有技术的缺陷或不足，本发明提供了骨相关间充质干细胞CD166⁺亚群的制备方法。

为此，所提供的制备方法包括：利用抗-CD45、抗-Ter119和抗-CD166 对骨相关间充质干细胞进行分选得到骨相关间充质干细胞CD166⁺亚群。

本发明同时还提供了骨相关间充质干细胞CD166⁺亚群用于治疗IBD的应用。

附图说明

图1.骨相关间充质干细胞CD166⁺亚群(CD166⁺MSCs)的鉴定。A-B. 流式细胞仪鉴定CD166⁺MSCs分选纯化的结果:A分选后细胞的血细胞标记 Ter119、CD45的阳性率；B:分选后细胞的CD166阳性率。C.光镜下 CD166⁺MSCs亚群培养7天的图片，显微镜放大倍率为400×。

图2.IBD模型的建立。给8周龄的C57BL/6小鼠饮用含3％DSS水7 天，正常饮水为对照组。每日监测体重、粪便情况、有无腹泻、血便、活动力等，。A.每日体重变化；B.临床评分的变化；C.建模第7天，处死小鼠，分离结肠图片；D.结肠长度的分析。Ctrl：对照组；DSS：饮用3％DSS水组。N＝5，**P0.001。