[发明专利]一种用于微核和染色体试验的制片方法在审
申请号: | 202010981427.X | 申请日: | 2020-09-17 |
公开(公告)号: | CN112014189A | 公开(公告)日: | 2020-12-01 |
发明(设计)人: | 李茂进;李珏;王建国;牛东升;董华凰;郭向云;白洁 | 申请(专利权)人: | 北京市化工职业病防治院(北京市职业病防治研究院) |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/30 |
代理公司: | 北京绘聚高科知识产权代理事务所(普通合伙) 11832 | 代理人: | 罗硕 |
地址: | 100000 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 染色体 试验 制片 方法 | ||
1.一种用于微核和染色体试验的制片方法,其特征在于,包括如下步骤:
细胞培养后吸弃上清液低渗处理1-30min,添加固定液预固定1-5min;
离心后添加所述固定液6-12ml固定20-40min,然后再离心、滴片。
2.根据权利要求1所述的制片方法,其特征在于,所述固定液为醇类和醋酸的混合物,所述醇类与所述冰醋酸的体积比为(2-4):1,优选地体积比为3:1;
优选地,所述醇类为甲醇、乙醇中的任意一种或两种,优选地为甲醇与乙醇的混合物,所述乙醇与甲醇的体积比在3:1以下。
3.根据权利要求1所述的制片方法,其特征在于,低渗处理采用浓度为0.05-0.1mol/L的KCl水溶液再混匀吹打,KCl水溶液预先预热至30-40℃之间。
4.根据权利要求3所述的制片方法,其特征在于,低渗处理采用浓度为0.075mol/L的KCl水溶液。
5.根据权利要求3所述的制片方法,其特征在于,KCl水溶液预先预热至37℃。
6.根据权利要求3所述的制片方法,其特征在于,所述混匀吹打的次数为20-30次。
7.根据权利要求1所述的制片方法,其特征在于,离心的速率为1000-1500rpm/min。
8.根据权利要求1所述的制片方法,其特征在于,离心的时间为8-12min。
9.根据权利要求1-8任一项所述的制片方法,其特征在于,离心后添加所述固定液固定25-35min,优选地为30min。
10.根据权利要求1-8任一项所述的制片方法,其特征在于,滴片的过程中,每一片上滴3-5滴,自然晾干。
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