[发明专利]一种三叶青的提纯物及提纯方法

说明书

本发明提供一种三叶青的提纯物，所述提纯物至少包括SYQ‑D30‑1S8P2、SYQ‑D30‑2S9P1、SYQ‑D30‑3S11P3、SYQ‑D30‑3S14P2、SYQ‑D30‑4S5P1、SYQ‑D30‑4S8P2P1、SYQ‑D30‑5S11P1、SYQ‑D30‑1S8P4、SYQ‑D30‑5S8P1P1。一种三叶青的提纯方法，包括以下过程：S1、三叶青药材提取及检测；干燥三叶青药材粉末5kg，用70％乙醇回流提取3次，每次1.5h；提取液经LCMS检测；S2、HP‑20大孔吸附树脂富集；将提取液浓缩至小体积，用10％乙醇超声溶解，经HP‑20大孔树脂吸附后，分别用10％、30％、50％、95％乙醇梯度洗脱收集，各部分洗脱液经LCMS检测；S3、正相中压柱分离；本发明提取这九种化合物的提取方法，提取效率高，提取纯度高。

技术领域

本发明属于三叶青提纯技术领域，具体涉及一种三叶青的提纯物及提纯方法。

背景技术

胰腺癌是恶性度极高的实体肿瘤之一。近年来，胰腺癌的发病在全世界范围内均呈现逐年升高的趋势。其中95％的胰腺癌为胰腺导管细胞癌(pancreatic ductaladenocarcinoma，PDAC)。PDAC具有高侵袭转移的特性，早期缺乏明显的临床症状和体征，约60％的患者在确诊时已经出现了远处转移，25％的患者处于晚期，无法进行根治性切除手术，而根治术后早期的转移和复发也是导致其预后不良的重要原因。在美国，PDAC的五年生存率为8％左右，而英国只有3％，故PDAC可以被认为是一种致死性的癌症。由于胰腺癌早期诊断困难，手术切除率低，放化疗联合的多学科治疗是目前临床上治疗胰腺癌的主要手段。随着吉西他滨等化疗药物的研发和应用，如吉西他滨联合卡培他滨的辅助化疗方案是欧美胰腺癌切除术后的标准治疗，但是化疗药物的不良反应、低应答率及其在亚洲人群的治疗效果仍在进一步研究中，需要新的循证医学证据。因此，寻找新的胰腺癌的化疗药物治疗靶点具有重要意义。

在前期的研究阶段，我们发现三叶青的粉剂对胰腺癌具有一定的抑制作用，但对于其有效成分尚不明确，因此，本发明通过相应的提取手段提取出有效成分。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在问题或不足，本发明提供一种三叶青的提纯物及提纯方法。

为实现上述发明目的，本发明的实施例提供一种三叶青的提纯物，其特征在于，所述提纯物至少包括SYQ-D30-1S8P2、SYQ-D30-2S9P1、SYQ-D30-3S11P3、SYQ-D30-3S14P2、SYQ-D30-4S5P1、SYQ-D30-4S8P2P1、SYQ-D30-5S11P1、SYQ-D30-1S8P4、SYQ-D30-5S8P1P1。

本发明的实施例还提供一种三叶青的提纯方法，其特征在于，包括以下过程：

S1、三叶青药材提取及检测

干燥三叶青药材粉末5kg，用70％乙醇回流提取3次，每次1.5h；提取液经LCMS检测；

S2、HP-20大孔吸附树脂富集

将提取液浓缩至小体积，用10％乙醇超声溶解，经HP-20大孔树脂吸附后，分别用10％、30％、50％、95％乙醇梯度洗脱收集，各部分洗脱液经LCMS检测；

S3、正相中压柱分离

将30％、50％、95％乙醇洗脱液合并，减压浓缩后得到的干燥样品，采用二氯甲烷-甲醇，按照1:1溶解，硅胶拌样，正相中压硅胶柱分离，采用二氯甲烷-甲醇体系梯度洗脱(100:0-0:100)，共收集到馏分15份；LCMS分析合并相似组分，合并后组分分别为SYQ-D30-1(1)、SYQ-D30-2(2)、SYQ-D30-3(3)、SYQ-D30-4(4)、SYQ-D30-5(5～6)、SYQ-D30-7(7～10)、SYQ-D30-11(11～15)；取样分析，LCMS检测；