[发明专利]一种急性热应激动物模型及其构建方法和应用有效
| 申请号: | 202010960778.2 | 申请日: | 2020-09-14 |
| 公开(公告)号: | CN112219787B | 公开(公告)日: | 2022-10-04 |
| 发明(设计)人: | 李伟豪;刘逸雷 | 申请(专利权)人: | 佛山科学技术学院 |
| 主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02 |
| 代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 刘俊文 |
| 地址: | 528000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 急性 应激 动物 模型 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种急性热应激动物模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:将动物在41℃的温度下饲养12h作为造模期,然后在18~20℃的温度下饲养5~7d;
在造模期之前,将动物预先喂养12h,自由饮水和进食;
所述动物为鸡,其体重为2~3kg;
所述构建方法制得的急性热应激动物模型,属于免疫能力低的易感动物模型。
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述急性热应激动物模型在评价抗热应激药物效果领域中的应用,包括以下步骤:将模型动物分成两组,分别喂食正常饲料和添加有抗热应激药物的饲料,饲养4~5d,然后将模型动物处死,收集脾脏和肝脏,测定脾脏和肝脏的器官指数,并测定脾脏中HSP70,IFN-α,IFN-β和IL-1β的蛋白表达量。
3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述测定脾脏中的HSP70,IFN-α,IFN-β和IL-1β的蛋白表达量的具体过程为:提取脾脏的蛋白质,变性后进行电泳,然后将蛋白条带印迹到转印膜上,将其浸入至封闭溶液中;以β-肌动蛋白作为内部对照,针对HSP70,IFN-α,IFN-β和IL-1β的一抗进行免疫印迹,然后用缓冲溶液洗涤后与HRP标记兔抗小鼠IgG抗体一起温育1h,然后使用发光试剂盒进行显色,最后采用ImageJ软件得出HSP70,IFN-α,IFN-β和IL-1β的蛋白质表达量。
4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述转印膜为聚偏二氟乙烯膜。
5.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所使用的电泳凝胶为10%或15%的SDS-PAGE。
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