[发明专利]白桦脂酸衍生物在制备抗肾病变药物中的应用

说明书

本发明属于医药领域，公开了一类白桦脂酸衍生物或其药学上可成的盐及其制备抗肾纤维化药物中的应用。本发明利用微生物转化技术，对白桦脂酸成功地进行了结构修饰，获得了多个新型白桦脂酸衍生物，通过体外TGF‑β1诱导的HK‑2细胞试验证实，这些化合物具有较好的保护HK‑2细胞损伤作用。可以作为预防或治疗肾病药物的活性成分，具有广泛的用途。

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及白桦脂酸衍生物在制备抗肾病变药物中的应用。

背景技术

肾脏纤维化是各种原因的慢性肾脏疾病发展到后期的共同病理学表现，是造成CKD的主要原因。肾脏纤维化的病理特征主要表现为肾间质细胞外基质包括胶原纤维、纤维粘连蛋白的大量堆积，伴随炎性细胞浸润，肾小管上皮细胞凋亡、丢失，纤维细胞及肌成纤维细胞增生，肾小管管周血管稀疏化改变，最终导致肾小球硬化和肾小管间质纤维化，肾功能丧失。在此病理生理过程中，肾细胞凋亡起着非常重要的作用。细胞凋亡异常主要包括间质成纤维细胞的凋亡减少和肾小管上皮细胞的凋亡增加，分别对应着形态学上的肾间质纤维化和肾小管扩张、萎缩。肾小管上皮细胞凋亡可能是纤维化肾脏萎缩的重要原因，故能够调控肾细胞凋亡特别是抑制肾小管上皮细胞凋亡的药物，就极可能对肾纤维化具有实际的治疗作用。

白桦脂酸是一类结构比较特殊的五环三萜类成分。其结构特点是E环为五元碳环，且在E环19位有异丙基以-构型取代，五个环间均为反式排列。该类成分主要分布于桦树皮、酸枣仁、天门冬、白头翁等中药材中，是上述中药的主要有效成分。但是，白桦脂酸在自然界中含量很低，可以白桦脂醇为前体经过化学反应或生物转化等制得。白桦脂酸及其衍生物作为生物制剂在抗艾滋病毒和抗肿瘤等方面表现除了巨大的潜能。此外，白桦脂酸还具有抗疟疾、抗炎等生物活性。目前，白桦脂酸的抗肾纤维化活性研究报道较少。

微生物转化是利用生物体自身特异性的酶体系进行的酶催化反应，因此反应的类型多，并具有高度立体及区域选择性，成为了有机合成中的一个重要工具。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供白桦脂酸衍生物在制备抗肾病变药物中的应用，具体提供了白桦脂酸衍生物或其药学上可成的盐在制备抗肾病变药物中的应用，肾病变为与肾纤维化有关的疾病，如慢性肾炎、肾硬化或肾癌，这些白桦脂酸衍生物对TGF-β1诱导的HK-2细胞具有良好的保护作用，具有较好的抗肾纤维化活性。本发明中，白桦脂酸衍生物为结构式为式Ⅰ-式Ⅵ的化合物：

本发明还提供了上述白桦脂酸衍生物的制备方法，包括如下步骤：

1)发酵培养微生物，向培养基中加入白桦脂酸，接着进行转化培养，除去菌丝体后得到发酵液，所述微生物为卷霉(Circinella)属的菌株；优选采用蝇卷霉Circinellamuscae CGMCC 3.2695。

2)将所述发酵液经萃取后，蒸干萃取液，得到转化粗提物；

3)将所述转化粗提物用反相高效液相色谱纯化，得到产物。

上述方法步骤1)中培养基中白桦脂酸的浓度为2-5000μg/mL。

上述方法步骤2)中萃取溶剂为常规机型有机溶剂，优选乙酸乙酯。

上述方法步骤3)优选反相高效液相色谱制备条件为半制备用色谱柱YMC ODS-A，10.0I.D×250mm，乙腈-水(30:70，V/V)，流速2.5mL/min，检测波长203nm。

本发明通过实验证实，本发明所述白桦脂酸衍生物具有良好的抗肾纤维化活性，可以作为抗肾病变药物的活性成分。这些抗肾病变药物的活性成分可以是选自结构式为式Ⅰ、式Ⅱ、式Ⅲ、式Ⅳ、式Ⅴ和式Ⅵ的化合物中的一种或几种。