[发明专利]一种SARS-CoV-2病毒的N抗原检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及免疫分析医学领域，具体地，具体涉及一种SARS‑CoV‑2病毒的N抗原检测试剂盒及其制备方法。所述试剂盒包括包被SARS‑CoV‑2病毒的N抗体的反应板、样品稀释液、酶标记物、显色底物液、洗涤液、阴性对照和SARS‑CoV‑2病毒N抗原阳性对照。本发明的试剂盒兼具窗口期短、灵敏度高、特异性好、取样简便、操作简单、结果容易判定等优势。适用于早期诊断，且诊断迅速、准确、对设备和人员要求低，能够批量快速处理大量样本，可以实现自动化处理。

技术领域

本发明涉及免疫分析医学领域，具体地，具体涉及一种SARS-CoV-2病毒的N抗原检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

新型冠状病毒(SARS-CoV-2，2019-nCOV)的正式分类名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)。该疾病主要通过飞沫传播，该病毒症状一般为发热、乏力、干咳、逐渐出现呼吸困难，严重者表现为急性呼吸窘迫综合征，脓毒症休克，难以纠正的代谢性酸中毒和凝血功能障碍。具有传染性高、传播快、症状重、死亡率高、无特效药物、无疫苗预防等特点。

新型冠状病毒基因组依次编码刺突蛋白(Spike protein，简称S蛋白)、包膜蛋白(Envelope protein，简称E蛋白)、膜蛋白(Membrane protein，简称M蛋白)和核衣壳蛋白(Nucleocapsid，称N蛋白)。N蛋白是SARS-CoV-2的重要结构蛋白，是一种核衣壳碱性磷酸化蛋白，在病毒的包装、复制和蛋白质翻译等过程中起关键作用。

目前新冠病毒检测方法主要有：核酸检测和抗体检测。核酸检测能够早期检测到咽拭子中的病毒抗原序列，是目前检测新冠病毒的金标准；但缺点也比较明显，取样困难、医护人员高度暴露容易感染、取样不准确容易漏检、假阳性率高、检测耗时较长；需要配备较复杂的仪器、操作人员需要进行培训，导致检测成本高、操作复杂，且样品处理量有限。抗体检测操作简单方便、快速、对设备和人员要求低，适用于大量疑似病例和无症状感染者检测，最快15分钟内出结果，但是由于平台所限，其灵敏度相对较低，变异大，检测窗口期较长，不能满足对发热早期患者筛查的需要。

目前广泛采用的是核酸检测为主，抗体检测为辅的方式。核酸和抗体检测各有侧重，不能相互替代，多种检测方法联合应用，互为补充，发挥各自优势，可有效缩短检测窗口期，提高阳性检出率，为各种可能的风险人群提供双重保障。

发明内容

本发明为解决现有技术中的上述问题提出的一种兼具窗口期短、诊断迅速、灵敏度高、特异性好、重复性好、取样简便、操作简单、结果容易判定等优势的试剂盒及其制备方法。

本发明的目的在于提供一种SARS-CoV-2病毒的N抗原检测试剂盒及其制备方法。

为了实现本发明的上述目的，本发明所采取的技术方案为：

本试剂盒采用双抗体夹心法原理检测人血清、血浆、咽喉部分泌物中的SARS-CoV-2病毒的核衣壳蛋白抗原(以下简称“N蛋白抗原”)。预先采用SARS-CoV-2病毒的N蛋白抗体包被固相载体，加入样本后，若样本中含有SARS-CoV-2N蛋白抗原，则与固相载体结合，再与加入示踪物标记的SARS-CoV-2N蛋白抗体结合，形成固相抗体-抗原-示踪物标记抗体的夹心复合物，温育后洗涤除去未结合的样本和示踪物，加入配套底物，读数，根据临界值判断样本中是否含有SARS-CoV-2(2019-nCOV)N蛋白抗原。

根据本发明的试剂盒包括包被有SARS-CoV-2病毒的N抗体的反应板、样品稀释液、酶标记物、显色底物液、洗涤液、阴性对照和SARS-CoV-2病毒N抗原阳性对照以及其它辅助试剂。

根据本发明的试剂盒，其中，所述反应板为透明聚苯乙烯微孔板或白色不透光聚苯乙烯微孔板、黑色不透光聚苯乙烯微孔板。更优选为，透明聚苯乙烯微孔板或白色不透光聚苯乙烯微孔板。