[发明专利]一种金耳子实体菌种的复壮方法

说明书

本发明属于食用菌育种技术领域，具体涉及一种金耳子实体菌种的复壮方法，其包括一次或多次将金耳子实体打浆和将浆液涂布在改良PDA培养基上培养的步骤。本发明方法旨在给金耳子实体退化菌种复壮及脱毒、脱杂菌，能有效恢复菌种的生产能力、抗病能力，为种植户规避风险。

技术领域

本发明属于食用菌育种技术领域，具体涉及一种金耳子实体菌种的复壮方法。

背景技术

金耳Naematelia aurantialba(Bandoni et Zang)MillanesWedin为耳包革科耳包革属真菌，(金耳的曾用学名为Tremella aurantialba Bandoni et Zang，属银耳科银耳属真菌)，是著名的食用菌和药用药，野生资源主要分布于云南丽江、香格里拉、西藏等地，资源有限，每年全国采摘量在10吨(干)以内。上个世纪80年代，云南昆明食用菌研究所最早实现了人工椴木和袋料栽培^[1-2]。

金耳子实体是异质型复合体，金耳子实体中有毛韧革菌和金耳菌，因此金耳的菌种制作基本都是用子实体多代扩大繁殖而来。

金耳从栽培成功至今虽然已经有30多年历程，但是整个金耳产业还处于初级阶段(年产量远远小于金针菇的日产量)，无论是利用分步接种法还是混合菌种法，子实体都是种源，随着金耳子实体的扩大繁殖次数增多，菌种生产性能快速退化，菌种携带病毒细菌等，使栽培成功率降低，产量减少，甚至绝收。

发明概述

为解决上述技术问题，本发明提供一种金耳子实体退化菌种的复壮方法，能有效恢复菌种的生产能力、抗病能力，为种植户规避风险。

具体而言，本发明涉及一种金耳子实体菌种的复壮方法，其包括将金耳子实体打浆和将浆液涂布在改良PDA培养基上培养的步骤。该复壮方法同样适用于其他异质型菌类菌种。

根据本发明，改良PDA培养基包括马铃薯200克/L、葡萄糖10克/L、蛋白胨3克/L、磷酸二氢钾3克/L、柠檬酸1.2克/L、贝壳粉1克/L、琼脂18克/L。

根据本发明，金耳子实体打浆是将无菌金耳子实体与无菌水混合(两者比例1:1-50(wt/vol)，例如1:40(wt/vol)，1:30(wt/vol)，1:20(wt/vol)，1:10(wt/vol)，1:5(wt/vol)等)、再经破碎机打成浆状。

根据本发明，在改良PDA培养基上培养是指在22℃恒温箱内暗培养25-35天，培养基中长出多个直径0.5cm左右(±0.2cm)大小、新的金耳小子实体。

根据本发明，该复壮方法进一步包括将上述生长形状好、新的金耳小实体挑出，然后再次打浆和培养的步骤。

根据本发明，该复壮方法包括多次(例如三次)重复打浆和培养的步骤。

根据本发明，该复壮方法还包括金耳子实体栽培种培养、栽培袋接种、出菇管理以及菌种扩繁的步骤。

具体而言，本发明涉及一种金耳子实体菌种的复壮方法，包括下列步骤：

(1)在超净工作台中，取无菌金耳子实体0.5克与5毫升无菌水混合，利用破碎机将之打成浆状，涂布至改良PDA培养基上，在22℃恒温箱内暗培养25-35天，培养基中会长出多个直径0.5cm左右大小、新的金耳小子实体，其中改良PDA培养基包括马铃薯200克/L、葡萄糖10克/L、蛋白胨3克/L、磷酸二氢钾3克/L、柠檬酸1.2克/L、贝壳粉1克/L、琼脂18克/L；

(2)将生长性状好、新的金耳小子实体分别挑出，并标记，然后重复上述(1)步骤，重复两次；