[发明专利]一种纯化学亚硫酸铋琼脂培养基及其应用

权利要求书

1.一种纯化学亚硫酸铋琼脂培养基，其特征在于，所含成分及质量浓度如下：

2.如权利要求1所述纯化学亚硫酸铋琼脂培养基的配制方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制作母液

按成分称取10倍浓度的氨基酸和维生素，分别溶于200mL蒸馏水中，制成氨基酸母液和维生素母液；同样的方法称取无机盐，先将氯化钾、磷酸氢二钠和硫酸镁溶于200mL蒸馏水中，混合均匀后再加入四水硝酸钙，搅拌均匀后制成无机盐母液；

(2)制作替代物

分别取步骤(1)中氨基酸母液20mL、维生素母液20mL和无机盐母液20mL，混匀，制备成牛肉膏和蛋白胨替代物；

(3)制作培养基

取葡萄糖1g、硫酸亚铁0.06g、磷酸氢二钠0.8g、亚硫酸钠1.2g、柠檬酸铋铵0.4g、0.1％煌绿5支和琼脂3.8g，先将步骤(2)与葡萄糖混匀溶解，再将硫酸亚铁、柠檬酸铋铵、磷酸氢二钠、亚硫酸钠分别加入10mL蒸馏水，加热搅拌溶解，同时100mL蒸馏水与琼脂搅拌煮沸溶解；最后混匀硫酸亚铁、柠檬酸铋铵、磷酸氢二钠、亚硫酸钠溶液后倾倒入步骤(2)中，混匀后立即与煮沸的琼脂搅拌，待溶液冷却到50-60℃时将pH调至7.5迅速倒入0.1％煌绿5支，混合均匀后既得自制的200mL亚硫酸铋琼脂纯化学成分合成培养基，倾注平板备用。

3.如权利要求2所述纯化学亚硫酸铋琼脂培养基的应用，其特征在于，用于培养大肠埃希氏杆菌CMCC44102、鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028和伤寒沙门菌CMCC50071。

4.如权利要求3所述纯化学亚硫酸铋琼脂培养基的应用，其特征在于，菌悬液的制备及接种：分别取CMCC44102、CMCC50071和ATCC14028菌株接种到营养肉汤中，36℃下培养18h-24h，制成菌液浓度为200-2000CFU/mL，用1μL接种环取选择性测试工作菌悬液1环，在待测培养基和参比平板表面划六条平行直线，平行接种两个平板，36℃下培养18h-24h。