[发明专利]一种ι-卡拉胶四糖的高效定向制备方法在审
| 申请号: | 202010931539.4 | 申请日: | 2020-09-08 |
| 公开(公告)号: | CN112011582A | 公开(公告)日: | 2020-12-01 |
| 发明(设计)人: | 常耀光;曹斯琦;申晶晶;梅轩玮;张玉莹;薛长湖;王玉明;薛勇 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
| 主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12P19/00;C12N9/38;C12N15/70;C12N15/56 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 卡拉 胶四糖 高效 定向 制备 方法 | ||
1.一种ι-卡拉胶四糖的高效定向制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)配制质量浓度为0.1%-2.0%底物溶液;
(2)将ι-卡拉胶酶与上述卡拉胶溶液按照酶底比5U/g-500U/g,在15-40℃下振荡反应3-8h;
(3)灭活酶蛋白;
(4)干燥得到ι-卡拉胶四糖。
2.如权利要求1所述的ι-卡拉胶四糖的高效定向制备方法,其特征在于:所述的ι-卡拉胶酶的氨基酸序列为SEQ ID NO.1以及经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸且具有此种酶活性的,由此所衍生的酶。
3.如权利要求1或2所述的ι-卡拉胶四糖的高效定向制备方法,其特征在于:所述的ι-卡拉胶酶通过制备重组质粒、将重组质粒导入宿主菌构成重组菌株,经菌体表达、收集得到。
4.如权利要求3所述的ι-卡拉胶四糖的高效定向制备方法,其特征在于:所述重组质粒的宿主菌为大肠杆菌。
5.如权利要求1或2所述的ι-卡拉胶四糖的高效定向制备方法,其特征在于:所述底物为ι-卡拉胶。
6.如权利要求5所述的ι-卡拉胶四糖的高效定向制备方法,其特征在于:步骤(4)所述ι-卡拉胶四糖的纯度不低于80%。
7.如权利要求1或2所述的ι-卡拉胶四糖的高效定向制备方法,其特征在于:在步骤(3)和(4)之间耦联超滤和/或层析处理以进一步提高产品纯度。
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